流式细胞术是一种重要的细胞分析技术，可以用于细胞计数、细胞表型分析和细胞排序等。在进行流式细胞术之前，进行质量控制是非常重要的，以确保实验的准确性和可靠性。本文将详细介绍流式细胞术的质量控制方法。

1. 流体系统校准

流体系统包括流量计和压力传感器。首先，通过测量实际流速和压力来校准流量计和压力传感器。将标准流体注入流量计，测量流速并校准。将标准压力注入压力传感器并测量输出值，然后校准。

2. 激光系统校准

校准激光系统旨在确定激光束位置，以便在样本容器中获得正确的光学读数。使用校准珠固定在流式细胞仪样本管中，使用激光照射校准珠并确定激光束位置。

3. 光学系统校准

校准光学系统是确保样本分析时光学读数准确的关键。校准光学系统包括检测器和同步器。检测器负责测量样品中免疫染色颗粒的数量和大小。同步器负责确保检测器测量样品时以正确的频率进行测量。

4. 标准颗粒校准

流式细胞仪校准的最后一个步骤是使用标准微粒校准仪对样本进行标准化。使用宽敞的样品管，在不同的浓度下测试标准微粒。校准标准曲线后，流式细胞仪可以精确地计算样品中特定免疫染色颗粒的数目和特征。

流式细胞仪校准

1.清洁流式细胞仪的样品室，并检查激光器和光路系统是否正常工作。

2.使用粒子标准物质检查细胞仪的散射、荧光和时间参数的准确性。

3.清洗和校准流式细胞仪的液体系统，确保流速和样本量的准确控制。

流式细胞仪性能的质量控制

a.定期检查流式细胞仪的性能参数，包括散射灵敏度、荧光检测灵敏度和时间分辨率。

b.使用校准颗粒检验流速的准确性和一致性，

c.根据实验需要，使用合适的质检颗粒进行分辨率和强度的调

样品准备

1.均匀悬浮细胞样本，避免细胞团聚和沉积。可通过离心和重新悬浮样本来实现。

2.使用质量可靠的细胞染色方法，确保染色的准确性和一致性。

3.调整样本的浓度，以避免过度聚焦和细胞过于稀疏而损失信号。

样本纯度的质量控制

a.使用合适的负对照和正对照来评估染色的纯度。例如，使用未染色细胞作为负对照，使用己知阳性标记的细胞作为正对照

b.定期检查染色结果的一致性，确保负对照细胞没有阳性标记正对照细胞有预期的阳性标记

CytoFLEX即用型日常QC质控荧光微球仪器校准品中文介绍

CytoFLEX即用型每日QC荧光微球是3μm荧光微球的悬浮液，可用于流式细胞仪光学对准和液流系统的日常验证。该产品以预稀释的即用型形式提供，在以下波长下激发时，荧光发射波长在355nm至800nm 之间：355nm、375nm、405nm、488nm、561nm和638nm。将混合物悬浮在含有表面活性剂和稳定剂的水介质中。C65719取代了 CytoFLEX 日常QC荧光球 B53230，适用于CytoFLEX 细胞仪平台。

CytoFLEX即用型日常QC质控荧光微球仪器校准品英文介绍

CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres is a suspension of 3 µm fluorescent microspheres, which may be used for daily verification of the flow cytometer's optical alignment and fluidics system. This product is provided in a pre-diluted, ready-to-use format, with a fluorescence emission between 355 nm to 800 nm when excited at: 355 nm, 375 nm, 405 nm, 488 nm, 561 nm, and 638 nm. The mixture is suspended in an aqueous medium containing surfactants and stabilizers. Click here for CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres Instructions for Use. This product replaces the CytoFLEX Daily QC Fluorospheres, B53230, and should be used with the CytoFLEX cytometer platform.

CytoFLEX即用型日常QC质控荧光微球仪器校准品操作流程

1. Use the filter set recommended by the manufacturer for detecting the appropriate fluorescence parameters (refer to the CytoFLEX Platform IFU).

2. Ensure that the target value file for the specific lot of CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres has been loaded into the flow cytometer software. Refer to your CytoFLEX Platform IFU for instructions on importing your lot-specific target value file.

3. Vigorously mix the CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres vial using a vortex mixer for 2-3 seconds.

4. Add:

4. 10 drops of fluorospheres to a tube if using Semi Automatic (tube) Sample Injection Mode.

b. 3-4 drops of fluorospheres to a well for either Standard 96-well plate or Deep-well plate for the plate loader injection mode.

5. Run the Quality Control (QC) protocol per the instructions in your CytoFLEX Platform (IFU).

CytoFLEX即用型日常QC质控荧光微球仪器校准品注意事项

1. 产品为即用型产品，无需额外配制,直接使用。

2. 如果分装，密封好，5天内用完。

3. 荧光微球长时间静置，会自然沉降。确保在使用前将荧光球充分重悬摇匀。

4. 请勿使用超过样品瓶标签上有效期的荧光球。

5. 产品冷藏勿冻。

6. 处理此试剂时，请使用良好实验室规范 （GLP）。

7. 本试剂含有防腐剂，如果发生皮肤或眼睛接触，请用水及时深度清洗。

流式细胞仪校准报告的目的是记录所有流式细胞仪校准过程的详细信息。报告应包括以下信息：

1. 日期和时间

2. 流体系统校准数据

3. 激光系统校准数据

4. 光学系统校准数据

5. 标准微粒校准数据

6. 校准珠校准数据

7. 校准过程中发现的任何问题或异常情况

8. 执行校准的技术人员的姓名和签名