耐思细胞摇瓶培养瓶锥形瓶

NEST锥形培养瓶瓶身采用PETG材质制成 
· 具有优秀的耐化学性，可耐受多种化学品
· 瓶身采用PETG材质制成，环保，符合食品药品接触管理要求
· 透明度较强，更好的视野清晰观察

      HDPE瓶盖
  透气盖内覆0.22um疏水膜，阻菌透气，防止微生物污染,适用于悬浮培养

· 单个独立真空包装，取用方便，避免交叉污染

· 包装标识产品批号，质量可追溯
    · 电子束灭菌，SAL=10 ^-6
    · 无DNA酶、无RNA酶
    · 无热源、无内毒素

 耐思细胞摇瓶培养瓶锥形瓶试剂操作中的使用案例：

接种在摇瓶内用于摇瓶发酵试验或发酵罐生产的微生物菌种。用于接种传代第一代的种子称为“母瓶”，用于接种传代第二代的种子就叫做“子瓶”。 “母瓶”和“子瓶”均可应用在微生物发酵罐进行规模扩培传代培养。

一、培养基制备
在摇瓶中进行种子制备的主要目标是培养强生长活性的营养菌体，所以在配制培养基阶段必须以满足菌体生长要求为目的。比如在培养基中添加足量的营养物质，包括碳、氮源、缓冲液、无机盐和生长因子等物质。在培养基中添加缓冲液的主要作用是调节培养基中的PH值，是培养基的PH环境长期处于稳定状态。常用的PH调节剂主要有磷酸盐缓冲液、PBS缓冲液等。培养基分装完成，封口后需要置于高压灭菌锅中进行高压灭菌。 灭菌完成后缓慢降压，防止因气压骤降造成培养基冲击瓶塞。

二、种子接种

在进行摇瓶种子接种时，普遍采用的是斜面法或米孢子粒计数接入的方式。 如果采用米孢子粒计数接入接种法进行接种的缺陷在于，接种量的一致性很难掌握，这样容易导致摇瓶种子的质量稳定性差。因此，对于接种量较为敏感的菌种，一般会采用悬液接种法进行接种。悬液接种法是用蒸馏水将细胞或微生物孢子洗脱成为混合液，然后按固定体积数量接种在摇瓶种子培养基中的一种接种方法。悬液接种法增加了接种数量的均一、稳定性。 

三、振荡培养 

 摇瓶种子采用的振荡培养摇床主要有旋转式振荡和往复式振荡两种。正常情况下生产抗生素类的企业使用较多的是旋转式振荡摇床。旋转式振荡摇床由于在主轴和从动轴间会有25mm-50mm左右的偏心距产生，所以在振荡作用时更有利于气体交换。部分特殊的微生物也会使用振荡培养箱进行培养。 

四、收获保存 

摇瓶种子在培养完成后尽量立即使用。如果临时用不到的可放在4℃冰箱中保存，但是保存期以不超过3天为宜。为避免影响生产质量，这类冷藏处理的种子多数用于摇瓶发酵试验或小型发酵罐实验，一般不直接做生产用种子。

五、影响摇瓶种子的质量

影响微生物摇瓶种子质量的因素主要有：菌体浓度、培养基成分、接种密度、设备转速等。 

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