ApaLI内切酶

ApaLI内切酶（ApaLI restriction enzyme）是一种常用的限制性内切酶，属于Ⅱ型内切酶家族。ApaLI内切酶能够识别并切割DNA中特定的核苷酸序列，具有特定的切割位置和特异性。本文将对ApaLI内切酶的基本特性、作用机制、应用领域等方面进行详细介绍。

ApaLI内切酶 的基本特性：

ApaLI内切酶主要识别并切割DNA中的5'-GTGCAC-3'序列，切位为该序列的ApaLI酶切位点。该酶切位点的特异性使ApaLI内切酶在DNA分子中具有高度特异性，能够精确切割含有特定序列的DNA片段。ApaLI内切酶的活性受到环境因素（如pH值、离子浓度等）的影响，因此在实验操作中需要注意调节适宜的反应条件。

ApaLI内切酶的作用机制：

ApaLI内切酶是一种双链DNA内切酶，通过识别特定的核苷酸序列，在该序列的特定位置引发DNA链的切割反应。ApaLI内切酶在酶切位点周围与DNA分子形成复合物，通过水解作用将DNA链切断，产生两个具有粘性末端的DNA片段。这些粘性末端可用于DNA片段的连接、重组等进一步实验操作。

ApaLI内切酶的应用领域：

ApaLI内切酶在分子生物学领域广泛应用于DNA片段的切割、重组、连接等实验操作中。通过ApaLI内切酶的作用，可以在DNA分子中特异性地切割出含有目标序列的片段，进而进行进一步的DNA克隆、测序、PCR等实验操作。ApaLI内切酶还常用于构建重组质粒、定向基因突变等研究领域，为研究人员提供了强大的工具和手段。

LightNing® 快速内切酶是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶，适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。所有 LightNing® 快速内切酶在通用的 CutOne® 或 CutOne® Color Buffer 中都具有优良的活性，能够在 5~15 分钟内完成酶切。此外，百时美去磷酸化、连接试剂在 CutOne® Buffer 中均具有 100% 活性，支持一管化反应，提升“酶切 - 修饰 - 连接”的体验。

CutOne® Color Buffer包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。CutOne® Color Buffer 的红色染料与 2500 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与 10 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

特性和用法

ApaLI 内切酶可以快速内切酶，可在5~15 min内完成反应

建议反应条件

1× CutOne®缓冲液；

37℃温育；

参照“DNA 快速酶切流程”配制反应体系。

失活条件

80℃温育20 min。

甲基化敏感性

对于被 CpG 甲基化的 DNA，剪切可能受阻，对于被 EcoKI 甲基化的 DNA，剪切可能受阻。

产品组成