甘露醇卵黄培养基基础原理和使用方法
时间:2024-07-19 阅读:232
一、试验原理:
用于分离培养病原性金黄SE葡萄球菌。
蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;7.5%浓度氯化钠可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生长;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂,金黄SE葡萄球菌可分解培养基中的甘露醇产酸,使菌落周围变黄,并能降解卵黄中的卵磷脂使菌落产生晕圈。
二、培养基配方(g/L):
蛋白胨 | 10.0 |
D-甘露醇 | 10.0 |
牛肉粉 | 2.5 |
氯化钠 | 75.0 |
酚红 | 0.025 |
琼脂 | 15.0 |
pH 7.4±0.2 25℃ |
三、试验方法:
粉体装培养基的使用:
1. 称取本品112.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15分钟,待培养基冷却至45-50℃时,无菌操作,加入50%卵黄乳液30ml,摇匀,倾入无菌平皿,备用。
2. 制备质控菌液。
3. 选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。
4. 36±1℃需氧培养24-48小时,记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,36±1℃需氧培养24-48小时:
质控菌株菌株编号接种量(CFU)参比或计数培养基方法质控评定标准其他特征大肠埃希氏菌ATCC25922//半定量G≤1/伤寒SHA门氏菌ATCC14028//G≤1/金黄SE葡萄球菌ATCC653820-200TSA定量PR≥0.7黄色菌落,菌落周围有晕圈金黄SE葡萄球菌ATCC2592320-200PR≥0.7黄色菌落,菌落周围有晕圈表皮葡萄球菌CMCC(B)2606920-200PR≥0.7红色菌落,没有晕圈
五、注意事项:
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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