培养基的保存要求及方法
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145次一、GB4789.28培养基保存的一般要求
应严格按照供应商提供的贮存条件、有效期和使用方法进行培养基和试剂的保存和使用。
脱水合成培养基及其添加成分的质量管理和质量控制
脱水合成培养基一般为粉状或颗粒状形式包装于密闭的容器中。用于微生物选择或鉴定的添加成分通常为冻干物或液体。培养基的购买应有计划,以利于存货的周转(即掌握先购先用的原则)。实验室应保存有效的培养基目录清单,清单应包括以下内容:
容器密闭性检查;
记录第一次开封日期;
内容物的感官检查。
开封后的脱水合成培养基,其质量取决于贮存条件。通过观察粉末的流动性、均匀性、结块情况和色泽变化等判断脱水培养基的质量的变化。若发现培养基受潮或物理性状发生明显改变则不应再使用。
商品化即用型培养基和试剂
应严格按照供应商提供的贮存条件、有效期和使用方法进行保存和使用。
实验室自制培养基
在保证其成分不会改变条件下保存,即避光、干燥保存,必要时在5℃±3℃冰箱中保存,通常建议平板不超过2周~4周, 瓶装及试管装培养基不超过3个月~6个月,除非某些标准或实验结果表明保质期比上述的更长。
建议需在培养基中添加的不稳定的添加剂应即配即用,除非某些标准或实验结果表明保质期更长;含有活性化学物质或不稳定性成分的固体培养基也应即配即用,不可二次融化。
培养基的贮存应建立经验证的有效期。观察培养基是否有颜色变化、蒸发(脱水) 或微生物生长的情况,当培养基发生这类变化时,应禁止使用。培养基使用或再次加热前,应先取出平衡至室温。
二、培养基保存要点总结:
1、已开封的干粉培养基需放置避光、阴凉、干燥处密封保存
2、制备好的培养基如不立即使用,建议放置低温、避光处保存,必要时需放置2-8℃冰箱低温保存
3、多数平皿最佳保存温度为15-20℃,温度过低易出冷凝水,温度过高平皿易失水,含有不稳定成分的平皿建议放置2-8℃保存。
4、保存的培养基可在验证过的有效期内使用,一般含不稳定成分的培养基可在一周内使用,成分稳定的培养基可保存2-4周或更长时间,如发现有污染、失水、变色等现象则不可使用。
制备好的培养基如何进行保存:
1.含有琼脂的培养基,不可冷冻保存。结冰会破坏琼脂结构,出现皱缩现象。在使用冰箱冷藏平皿时,要避免接触制冷的位置;
2.含有染料的培养基(如煌绿乳糖胆盐肉汤、XLD等),需避光保存。光照会导致部分染料分解褪色;
3.需加入添加剂的培养基(如Baird-parker琼脂、PALCAM琼脂等),可将灭好菌的基础培养基保存,临用前加热溶化再加入添加剂;若已加入添加剂,视添加剂的稳定性确定保存期限;
4.制备好的平皿若要冷藏较长时间,需密封保存,防止水份过度散失;
5.特殊培养基在保存后需经处理再使用(如硫乙醇酸盐流体培养基需加热驱氧);
6.加热煮沸灭菌的培养基,需严格按照标准规定使用,不宜久存。如亚硫酸铋琼脂、XLD琼脂等,宜当天配制第二天使用,存放不超过48h。