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高效液相色谱法（HPLC）具有高压、高效、高速、高灵敏度、高选择性等特点，广泛应用于医药、环保、石化、食品、化工等行业，是现在分离分析的重要方法，本文着重介绍HPLC的工作原理、基本组成及高效液相色谱名词术语，使新学者快速了解高效液相色谱知识，在日常操作中理论与实践结合，确保HPLC的高效运行、快速分析。

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HPLC工作原理

100多年前植物学家Tswett(茨维特) 他将植物色素的石油醚提取液倒入装有碳酸钙的直立玻璃管，再加入石油醚使其自由流下,结果色素中各组份互相分离形成各种不同颜色的谱带，Tswett用希腊语chroma(色)和graphos(谱)描述他的

实验方法，即现在的Chromatography(色谱法)。

色谱法是通过是利用混合物中各组份在不同的两相中溶解、分配、吸附等化学作用性能的差异，当两相作相对运动时，使各组分在两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离，色谱法的本质是分离分析方法

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液相色谱仪是一种用液体作为流动相的色谱分离分析的方法，是基于金典色谱的理论，使用高压泵、化学柱和固定相分离柱以及高灵敏度的检测器，液相色谱仪和气相色谱仪之间有什么区别呢？这里小编就来给大家介绍一下，仅供参考，希望对大家有所帮助！

液相色谱仪和气相色谱仪之间的区别是：1、分析对象之间的区别

GC:适用于气化程度高，热稳定性好，沸点低的样品;但对于沸点高，挥发性差，热稳定性差，离子和高聚物的样品，特别是对于大多数生化样品而言，检测不到20％的有机物质。 HPLC：适用于溶解后可制成溶液的样品（包括有机介质溶液）,它不受样品的挥发性和热稳定性的限制,它是一种分子量大，气化困难，热稳定性差的生化样品，聚合物和离子。类型样品可用于广泛的应用，占有机物的80％。

2、流动相位差异的差异GC：流动相是惰性的，气体组分与流动相无亲和力，仅与固定相相互作用。HPLC：流动相为液体，流动相和组分具有协同作用力，可提高色谱柱的选择性，提高分离度，对分离起积极作用。此外，流动相有很多种，房间的选择范围很广。改变流动相的极性和pH也可以调节分离。当选择具有不同比例的两种或更多种液体作为流动相时，可以提高分离选择性。

3.运行条件的差异GC：变暖操作。HPLC：室温，高压。

使用液相色谱仪时应注意什么？更换流动相时，必须按照规定的程序进行，否则可能会出现问题，改变流动相有三种情况：互溶性的流动相的更换、无互溶性的流动相的更换和缓冲溶液的更换，在种情况下，使用准备更换的流动相*清洁吸滤器，然后打开仪器的排水阀并按下清洗按钮清洁泵中的流动相。

将吸滤器放入新的流镲中并减慢流量。清洁几分钟后，关闭排水阀。接下来清洁色谱柱和检测器池，直到基线稳定。对于第二种情况，首先使用与新旧流动相兼容的中间清洁溶液进行清洁，然后使用新的流动相进行清洁，与种情况相同。对于第三种情况，应使用蒸馏水作为中间清洁溶液，然后使用新的流动相清洗。

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