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采用氧糖剥夺(OGD,Oxygen-Glucose Deprivation)方法建模
将HL-1心肌细胞缺血缺氧处理:弃去细胞正常培养液,PBS清洗2-3遍,向培养板中加入含无糖无血清的DMEM培养液(自购,缺氧之前将正常DMEM培养基放人三气培养箱中用95%N2和5%O2平衡30min,降低培养基中氧的含量)。将细胞置于事先已通气95% N2、5% CO2或94% N2、1% O2、5% CO2的缺氧装置中,进行缺氧处理。
恢复培养:OGD处理6h后,将细胞转移至含有HL-1细胞培养基的正常条件下(37°C、5% CO₂)继续培养。
对照组(Control Group):对照组细胞没有接受OGD处理,仅在常规培养条件下(37°C、5% CO₂,含血清培养基)进行培养,以保持正常生长状态。
A. MSC镜下图 | B. HL-1镜下图 | C. OGD后HL-1镜下图 |
E. OGD后MSC与HL-1共培养镜下图 | F. OGD/R12h后MSC与HL-1共培养镜下图 |