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技术简介:
制备抗自体抗原抗体指的是用在正常免疫动物本体存在的正常蛋白、小分子,或者采用与天然免疫动物具有高度序列保守性或结构一致性的其他物种的蛋白、小分子作为抗原或半抗原免疫这些动物本身,来制备相应抗体的情况。由于免疫原在受试动物本身天然存在,免疫动物的免疫系统很难将其列为外源物质而启动清除反应(免疫反应),这是受机体自我保护机制调控的,因为一旦将这些外援的抗原视为免疫原,将极大地引发免疫系统对自身正常的具有类似结构的蛋白发起攻击,从而诱发自身免疫病。因此,这一类自体抗原的免疫原性往往非常低,如不考虑替换宿主物种,很难制备,但是有的时候,实验条件的限制,使我们无法做这样的选择,所以利用具有与目的抗原高相似性内源蛋白的动物制备抗体是一件极为困难的事情。
艾伯森生物依托公司动物模型技术团队的技术储备,在国内*提出采取目的抗原基因敲除先行制备基因敲除鼠再免疫的方法。利用这种方法,我们一方面避免了内源免疫原对实验的干扰,另一方面是的抗原的回转效果得到清晰的展现,在获得基因敲除动物以及有该种动物产生的自体免疫抗体的同时,还可以观察到这种机体水平上的目的蛋白免疫原注射效果,非常适合针对某一类抗原的大型课题研究。
服务组合
服务项目 (Service Items) | 周期(月) Time(months) | 多抗方案 polyclone | 杂交瘤/单抗方案 Hybridoma/Mmonoclone | |||
模型动物构建 Animal Model Construction | 基因敲除载体设计与构建 Plasmid construction | 6~8 | √ | √ | ||
Crisper/Cas9技术靶基因敲除 Target Gene Knock out or Cut off by Crisper/Cas9 | √ | √ | ||||
胚胎注射与筛选移植 Screening embryos injected with transplant | √ | √ | ||||
子代鉴定与扩繁保种 Progeny identification and propagation of conservation | √ | √ | ||||
分子改造与偶联 Molecular design \\ convertion \\conjugation | 多肽设计 Peptide design | ~2 | √ | √ | ||
多肽或蛋白合成 Peptide or protein synthesis | √ | |||||
免疫阶段 Immunization | 免疫2只小鼠 Immunized 2 mice | ~8 | √ | |||
免疫5只小鼠 Immunized 5 mice | √ | |||||
ELISA检测 Elisa detection | √ | √ | ||||
细胞融合与筛选 Fusion & Screening | 1.5 | √ | ||||
亚克隆阶段 subcloning | 1 | √ | ||||
腹水生产(5只小鼠) Ascites production (Injection on 5 mice) | 1 | √ | ||||
纯化与检测 Purification and detection | 亲和纯化 Affinity purification | ~1 | √ | √ | ||
特异性亲和纯化 Antigen specific affinity purification | ||||||
总周期(月) Total lead time(months) | 8~10 | 8~12 |
注:
1)价格面议;
2)请慎重考虑周期事宜,以上时间仅为理想条件下短周期;
3)目前,限于常用转基因动物大多以小鼠为模型,所以目前该项目多抗方案只能提供小鼠多抗制备。