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Pine-神经电化学
使用快速扫描循环伏安法(FSCV)的研究人员经常使用经典的电生理学/神经科学方法结合电化学研究。其中一种方法是电流刺激。通过插入一个刺激电极并传递一系列确定的电流脉冲,研究人员可以使突触中的囊泡释放其内容物。FSCV 研究的常见神经化学物质包括单胺类多巴胺、5-羟色胺。通过 FSCV 测量这些神经分子浓度的变化,同时进行电刺激是业内一种常见做法。本文介绍了现有的选项耦合电流刺激与 FSCV,使用pine WaveNeuro神经系列电化学工作站.
当前电刺激实施步骤:
使用由HDCV软件控制的WaveNeuro系统,用户将电流刺激添加到FSCV测量序列中有两种选择。用户可以:
1.将刺激电流引导至Pine Research“headstage cable connector ”
2.直接使用隔离器的电流刺激盒,发出刺激电流
采用Pine Research的WaveNeuro FSCV恒电位器以及HDCV软件。 在HDCV软件中,导航到“Set up Experiment”下的STIM选项卡(参见图1)。
在这个屏幕上,用户每帧中的模拟刺激脉冲。在图1中右侧,FSCV 波形与模拟刺激脉冲叠加。第三条曲线称为“错误”,用于指示脉冲序列和 FSCV 波形之间是否有任何重叠,这将在使用过程中引起问题。通过修改循环伏安(CV) RAMP 参数的 STIM 参数(或两者都修改)来解决任何红色曲线重叠区域。
在 Wave Neuro FSCV 电化学工作站上,找到顶部面板上标记为 STIMULUS 的区域(参见图2)。在那里,你会发现两个 BNC 连接器,一个用于输出信号(STIM OUT(AO3)作为电压的刺激序列)和一个 PASSTHRU BNC,它被动地接受输入并将其路由到headstage cable刺激连接器的终端。
刺激方法一:Passthrough 刺激
Pine headstage cable
PINE headstage cable的优势之一是 它具备两个连接终端。一个连接终端用于连接headstage、飞线、工作电极和参考电极。另一个连接器是一个常见的双管刺激连接器(305/CP,来自 Plastics1/Invvo1/P Technologies)。
另一个优势是将连接器物理层面接近工作电极和参考电极可用的位置可最大限度地减少将多个导线连接到已经十分拥挤的空间中
目前PASSTHRU刺激是通过以下几个综合方面实现的:
1.用户必须在 HDCV 中设置一个刺激脉冲序列,该序列与在电化学测量期间应用的 FSCV 斜率一致(即不重叠) 。
2.HDCV 中定义的脉冲序列作为电压输出,并映射到前面板上的 STIMULUS STIM OUT (AO3) BNC。这个电压必须传送到一个隔离的电流刺激盒,然后转换成电流。
3. 电流刺激盒的电流输出通过通过 Wave Neuro (电流输入前面板上的 PASSTHRU (headstage) BNC)的信号在headstage终端连接器处可用。
PASSTHRU方法产品配置:
进行此设置所需的组件/附件如下所示(参见图3和表1)。 但是下面的列表和图是将电流刺激通过头台电缆终端适配器headstage的基本设置。
Letter Code | Description | Part/Model |
A | FSCV Potentiostat with Stim Output | AF01FSCV4 |
B | BNC to Lemo (1) Cable | NL951B-xx |
C | Current Stimulus Isolator | NeuroLog NL800A |
D | Two-Lead 1 mm Pin to BNC Adapter | Pomona Electronics 3221/Digi-Key 501-1433-ND |
E | BNC (male-to-male) Cable | Widely available |
F | Headstage Cable Kit | [NEC-HS1] |
G | 305/CP Extension Cable | 305-305R Cable (specify length), custom |
H | 305 Stimulating Electrode | 305 Style/MS303 Style Electrodes (various) |
刺激方法二:直接刺激方法
另一种选择是将刺激电流直接从当前的刺激隔离器输送到动物体内。初始设置与上面的passthrough选项相同,但是电流不是通过WAveNeuro传输到headstage的末端,而是直接传输到动物身上。
直接刺激是通过以下几个综合方面实现的:
1.用户必须在 HDCV 中设置一个刺激脉冲序列,该序列与在电化学测量期间应用的 FSCV 斜率一致(即不重叠)
2.HDCV 中定义的脉冲序列作为电压输出,并映射到前面板上的 STIMULUS STIM OUT (AO3) BNC。这个电压必须传送到一个隔离的电流刺激盒,然后转换成电流。
3.然后,通过连接适当的电缆和刺激电极,电流刺激箱的电流输出可以直接输送到动物体内。进行此设置所需的组件/附件如下所示。下面的图是电流刺激通过haadstage电缆终端适配器的基本设置。
直接刺激方法产品配置
Letter Code | Description | Part/Model # (link) |
A | FSCV Potentiostat with Stim Output | AF01FSCV4 |
B | BNC to Lemo (1) Cable | NL951B-xx |
C | Current Stimulus Isolator | NeuroLog NL800A |
D | Solder Lugs to 305/CP Cable | 305-SL/2 |
E | 305 Stimulating Electrode | 305 Style/MS303 Style Electrodes (various) |