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RNeasy FFPE Kit Print
从福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片中纯化总RNA
创新的方法用于克服福尔马林造成的交联
有效的释放RNA而不破坏其完整性
高效的实验方案,在85分钟内即可获得纯化的RNA
RNeasy FFPE Kit专为从福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片中纯化总RNA而设计。*的裂解和孵育条件逆转福尔马林对RNA的修饰。并且裂解缓冲液可将RNA从组织切片中有效释放出来,防止RNA的进一步降解。试剂盒同样使用
用福尔马林固定组织会导致RNA-RNA和RNA-蛋白质的交联,这会影响RNA在酶学分析中的性能。FFPE样本固定和包埋同样会导致核酸的严重片段化。RNeasy FFPE Kit提供了*的裂解和孵育条件来逆转福尔马林对RNA的修饰。裂解缓冲液能使RNA从FFPE组织样本中有效释放,并防止进一步的RNA降解。经优化的条件能纯化得到所有可用的RNA,使用RNeasy FFPE Kit从FFPE样本中得到的RNA的产量比其他方法更高。
整个RNeasy FFPE操作流程可在85分钟内完成(参见"RNeasy FFPE procedure")。使用蛋白酶K裂解样本仅需15分钟。裂解后,样本在80ºC下孵育15分钟。之后,用DNase处理能有效去除样本中的基因组DNA,包括小的DNA/片段。后,使用RNeasy MinElute离心柱即可收集纯化的RNA,洗脱体积14–30 µl。
RNeasy FFPE Kit可纯化FFPE 样本中所有大于70 nt RNA,得到适用于RT-PCR等众多下游应用的RNA/片段。但是,从FFPE样本中纯化得到的RNA会严重片段化,不能用于需要完整RNA的下游应用。如果使用片段化RNA可能需要做些修饰(例如在RT-PCR时设计小的扩增子)。进行cDNA合成时,不能使用oligo-dT引物,而要使用随机或基因特异性引物。
特征 | 技术指标 |
应用 | PCR,qPCR,实时RT-PCR,微阵列 |
洗脱体积 | 14–30微升 |
规格 | 旋转柱 |
主要样本类型 | FFPE组织样本 |
处理 | 手动(离心),自动化(QIAcube) |
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | 核糖核酸 |
样本量 | 1 * 5 µm至4 * 10µm切片 |
技术 | 二氧化硅技术 |
每次运行或制备时间 | 70分钟 |
产量 | 变化 |