光学显微镜的观察方法主要包括以下几种：

明场观察（Bright-field Observation）：

是所有光学显微镜照明技术中很简单的一种。

样品照明是透射的白光，样品中的对比度由透射光在样品的密集区域中衰减引起。

明场显微镜图像的典型图样是明亮背景上的深色样品。

应用于常规镜检、病理、染色标本等领域。

荧光观察（Fluorescence Observation）：

利用某些分子能吸收特定波长的光线后再发射出更长波长的光线的特性（即荧光现象）。

通常使用荧光染料或转染技术将荧光团结合到目标组织或细胞器等结构上，再用荧光显微镜激发观察。

具有高特异性、高灵敏度，适用于定位、定性、定量的研究。

广泛应用于生物学研究、医疗诊断和产业应用等领域。

相差观察（Phase Contrast Observation）：

利用被检物体的光程（折射率×厚度）差进行镜检。

通过环状光阑和相板等特殊装置，将光的相位差转变为人眼可以察觉的振幅差（明暗差）。

使原来透明的物体表现出明显的明暗差异，对比度增强，适用于观察无色透明的标本，尤其适于培养的活细胞、组织观察。

微分干涉观察（Differential Interference Contrast, DIC Observation）：

利用偏振光，通过特制的棱镜将偏振光分解，使光束在相位上略有差别，从而使图像呈现出立体三维感觉。

可以使被检物体产生三维立体感觉，观察效果更直观，适用于无色透明活体标本的细微结构观察。

反射光暗场观察（Dark-field Observation with Reflected Light）：

利用反射光观察样品表面的超微小结构。

能够观察到小至0.004微米的结构，但无法进行准确的测量，仅适合观察。

偏光观察（Polarized Light Observation）：

利用光的偏振特性对具有双折射性物质进行研究鉴定。

可做单偏光观察、正交偏光观察、锥光观察等，广泛应用于矿物、化学等领域，以及人体及动物学方面的鉴别。

霍夫曼调制相衬观察（Hoffman Modulation Contrast Observation）：

利用斜射光照射，将相位梯度转变为光强度变化，用于观察未经染色的样品和活细胞。

适用于相位物体、双折射物体、染色试样、柱状物体以及具有表面和次表面特征的物体进行高分辨率显微观察。

这些观察方法各有特点，适用于不同的研究领域和样品类型。在实际应用中，需要根据研究目的和样品特性选择合适的观察方法。