产品名称:昆虫蜕皮激素(Ecdysone)ELISA试剂盒
操作步骤
1.标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.加酶:每孔加入酶标试剂 100μl,空白孔除外。
4.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 60 分钟。
5.配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用。
6.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
7.显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
8.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9.测定:以空白孔调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
昆虫蜕皮激素(Ecdysone)ELISA试剂盒
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