CCD841CON人正常结肠上皮细胞

CCD841CON人正常结肠上皮细胞

参考价: 订货量:
5000 1

具体成交价以合同协议为准
2021-10-22 15:09:37
821
属性:
供货周期:一周;规格:1 × 10^6 细胞数/1ml;应用领域:医疗卫生,化工,生物产业;主要用途:科研;
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产品属性
供货周期
一周
规格
1 × 10^6 细胞数/1ml
应用领域
医疗卫生,化工,生物产业
主要用途
科研
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武汉原生原代生物医药科技有限公司

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产品简介

CCD841CON人正常结肠上皮细胞介绍
CCD 841 CoN (ATCC CRL-1790) 细胞是拉伸的上皮样细胞,在培养中生长为扁平且杂乱无章的层。

详细介绍

CCD841CON人正常结肠上皮细胞

细胞介绍

CCD 841 CoN (ATCC CRL-1790) 细胞是拉伸的上皮样细胞,在培养中生长为扁平且杂乱无章的层。可以观察到一些圆形细胞堆积在附着的群体上,碎片中等至重。CRL-1790 是一种正常的人类二倍体细胞系,因此它最终会衰老。人口倍增水平 (PDL) 信息可在特定批次的分析证书上找到,并可在 ATCC 网站上找到。


细胞特性

1) 来源:女性 大肠

2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长(贴壁弱,消化时间短,时间过长会导致细胞不长)

3) 含量:>1x10^6 细胞数

4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5) 用途:仅供科研使用。


CCD841CON人正常结肠上皮细胞

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。


细胞接收后的处理

1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。

3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的*培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。


一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备DMEM 基础培养基 (0001),特级胎牛血清10 %  P/S 1%

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。换液频率:隔天换液。

3) 冻存液:90%FBS,10%DMSO,现用现配。

注意:

1.细胞经过运输后,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞si亡破碎形成碎片,是正常现象。贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,1000rpm(约150g)离心3-5min,弃上清。加5ml PBS重悬细胞,再1000rpm(约150g)离心3-5min,用新鲜的*培养基重悬接种到新的培养瓶。第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。

2.细胞生长不均时,可以将细胞消化吹散后加入新的培养基重新接种或传代。

细胞生长缓慢时,可以选择更换优质胎牛血清或者提高血清浓度(最高不超过20%)培养,也可以根据细胞生长状态,选择传代细胞到新的培养瓶中继续培养。


二. 细胞处理:

1) 冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL*培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,*培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml*培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,置于37℃培养箱中消化1分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,具体以细胞消化到相互分离但未脱落,轻敲几下可以下来为准,严禁消化到细胞*漂浮,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。


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