YAC 克隆的分析实验 实验库 参考来源:
时间:2021-12-24 阅读:858
材料与仪器
酵母菌
AHC YPD 甘油
培养箱 冷冻管
步骤
1. 用接种棒将含重组载体pYAC的AB1380菌株划线接种在AHC平板上,倒扣平板于30℃培养,直至长出1~3 mm 大小的红色菌落为止。
2. 短期保存:用Parafilm膜将平板周围封起来,于4℃可保存4~6周。
3. 长期保存:接种一个单独的YAC克隆的菌落于3.2 ml YPD培养基中,在30℃摇床过夜,然后加入1 ml 80%甘油,混匀,再分成0.2~1.0 ml 小份将甘油/菌悬液移至冷冻管中,-80℃保存。
2. 短期保存:用Parafilm膜将平板周围封起来,于4℃可保存4~6周。
3. 长期保存:接种一个单独的YAC克隆的菌落于3.2 ml YPD培养基中,在30℃摇床过夜,然后加入1 ml 80%甘油,混匀,再分成0.2~1.0 ml 小份将甘油/菌悬液移至冷冻管中,-80℃保存。
同实验其他方法
制备YAC DNA进行Southern印迹分析
1. 接种一个红色的含YAC克隆的酵母菌落于盛有20 ml AHC培养基的250 ml 三角烧瓶中,在旋转摇床上30℃ 250 r/min 振荡培养24 h。 2. 扩大
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