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提取基因组,细胞裂解是用物理方法、化学法还是酶解法?

时间:2024-06-06      阅读:513

提取基因组,细胞裂解是用物理方法、化学法还是酶解法?

  1. 物理方法

  2. 化学方法

大部分用化学法,但也有可能搭配使用。


细胞裂解的物理放方法指的是机械破碎,如匀浆法、研磨法、超声波处理法,还有反复冻融的方法。酶解法是将溶菌酶或蛋白酶K将入,使细胞壁破碎。化学法是使用含SDS或CTAB的溶液来对细胞进行处理,在一定的pH环境和变性条件下,细胞破裂,蛋白质变性沉淀,核酸被释放到水相


现在常用的是基因组提取试剂盒,大部分是用化学法裂解的。


但如果碰上一些特殊的实验样本,还需要多种方法搭配使用。


例如真菌,仅靠化学方法无法有效裂解,理解的方法是先机械破碎,同时搭配破壁酶降解细胞外壁,最后才是化学试剂破坏细胞膜。


那些拥有坚硬外壳、骨架或复杂的化学外层的样本,还需要进行一些预处理,例如粗分离,过滤掉大颗粒的杂志。


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