ZETA LIFE/美国 品牌
代理商厂商性质
深圳市所在地
一、产品说明
产品名称:MxSafe Plus核酸染料
品牌:ZETA LIFE
货号:MX017-500
规格: 500ul
储存条件: 4℃保存,有效期三年。
二、MxSafe Plus核酸染料特点
● 无毒性:MxSafe/MxSafe Plus*的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远远小于 EB。
● 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于 SYBR Green I。
● 稳定性高: 适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
● 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
● 操作简单:与 EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需 30 分钟且无需脱色或冲洗 , 即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
● 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳; 可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
● 与 EB 有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置:标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用,使用与观察 EB 相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。但是 MxSafe不能被 488 nm 氩离 子激光器或相似波长的可见光*激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。对于此类装置,我们推荐您使用 MxSafe Plus,它和 SYBR Green I 的光谱相似,灵敏度相当,但更加稳定。
三、使用方法
1.胶染法(用法同EB)
制胶时加入 MxSafe/MxSafe Plus 核酸染料(例如:每 50mL 琼脂糖溶液中加入 5μL MxSafe/MxSafe Plus 10,000× 储液 (以此比例类推)。 按照常规方法进行电泳。
鉴于 MxSafe/MxSafe Plus 的高灵敏性,建议减少 DNA 的上样量,推荐每条泳道 DNA 上样量是传统上样量的 1/2, 例如:传统上样量是 5ul/泳道,使用本成品用量就是 2.5ul/泳道,但是不能减少核酸染料的用量(例如:每 50mL 琼脂糖溶 液中继续加入 5μL MxSafe/MxSafe Plus)。
注意事项:
●此方法染色染料用量相对较少。500 μL 染料大约可以做 100 块 50mL 的胶。
●由于 MxSafe/MxSafe Plus 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇 晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将 MxSafe/MxSafe Plus 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然 后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。MxSafe/MxSafe Plus 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
●如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在, 则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或 选择泡染法染色。
●此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2.泡染法
(1) 按照常规方法进行电泳。
(2) 用 H2O 将 MxSafe/MxSafe Plus 10,000× 储液稀释约 3,300 倍到 0.1M NaCl 中,制成 3× 染色液。(例如 将 15μL MxSafe/MxSafe Plus 10,000× 储液和 5mL 1M NaCl 加到 45mL H2O 中)。
(3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的 3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色 30min 左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含 3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常 介于 30min 到 1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
注意事项:
●用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用 3 次左右。
●3× MxSafe/MxSafe Plus 染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
四、核酸染料比较
特别提醒:
●如果您使用的是紫外成像仪,请选择 MxSafe;如果您使用激光成像仪、蓝光透射仪或希望在可见光下观测,请选 择 MxSafe Plus。
●MxSafe Plus 染色后推荐使用 Zeta life 公司 DNA 凝胶成像可见光蓝光透射仪(货号:CMA001)和核酸扩增快速 检测仪(货号:CMA002)配合使用效果更加。
●在极少数情况下,质粒经某些酶切后的 DNA 样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决 定哪种方法更加合适。
仅供科学研究使用,禁止用于它用。