细胞周期的分析
时间:2021-08-11 阅读:7292
细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。细胞分裂期又称M期。细胞通过M期一分为二,有的可继续分裂进行周期循环,有的转入G0期。G0期是脱离细胞周期暂时停止分裂的一个阶段。但在一定适宜刺激下,又可进入周期(图1),合成DNA与分裂。G0期的特点为:在未受刺激的G0细胞,DNA合成与细胞分裂的潜力仍然存在;当G0细胞受到刺激而增殖时,又能合成DNA和进行细胞分裂。根据各个期细胞DNA的含量将细胞周期用G0/G1期、S期和G2/M期来表示,通过核酸染料标记,并由流式细胞仪进行分析,可以得到细胞各个时期的分别状态,计算出G0/G1期、S期和G2/M期细胞的比例,了解细胞的周期分布及细胞的增殖活性。当然,也可以通过检测细胞周期蛋白对细胞周期进行精确的分期,但常用的检测方法还是利用流式细胞仪进行分析。细胞周期分析常用于肿瘤的早期诊断、肿瘤的良恶性判断、观察细胞的增殖状态及周期分布和抗肿瘤治疗的疗效监测等。
在进行流式细胞仪检测细胞周期分布的时候,应注意以下几点:首先,消化细胞的时候,胰酶消化的时间不宜过长,防止对细胞膜的损伤。其次,细胞样品的采集要保证足够的细胞浓度,以大于106为宜。第三,细胞固定时,75%乙醇溶液固定效果较好,且固定时间不宜过长,固定后的细胞尽量随即上机检测,4℃保存时间不要过长。提前计划好实验,提前预约流式细胞仪的使用时间
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