ELISA技术-HRP-Streptavidin，关于辣根过氧化物酶标记原理？

昊然生物分享关于酶标记技术的相关知识点：

酶标记技术：Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）。ELISA的原理基于免疫反应，因此它常被用于生物医学、生物化学。

免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上，通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。

常用的标记物包括荧光素、酶和放射性核素等,用这3种标记物进行标记的免疫检测技术被称为3大免疫标记技术。目前,使用的免疫标记物还有化学发光物质、铁蛋白和胶体金等。

辣根过氧化物酶(HRP)标记的原理：

辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP )

HRP广分布于植物界，它是由无色的酶蛋白和棕色的铁吓啉结合而成的糖蛋白，糖含量18%。HRP由多个同功酶组成，分子量为40,000,等电点为pH3~9，酶催化的最适PH因供氢体不同而稍有差异，但多在pH5左右。酶溶于水和58%以下的硫酸铵溶液。HRP的辅基和酶蛋白最大吸收光谱分别为403nm和275nm，一般以OD403nm / OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的纯度。

HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染料，通过反应可生成有色的氧化型染料(D)。

辣根过氧化物酶标记方法

酶标记抗体的制备方法主要有两种,即戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法。

辣根过氧化物酶的标记常用过碘酸盐氧化法,这种方法法只适用于含糖量较高的酶·过碘酸钠将HRP分子表面的多糖氧化为醛基，醛基与抗体分子上的氨基形成Schiff碱而结合·后者可进一步用NaBH4(或乙醇胺)还原生成稳定的酶标记抗体。

ELISA技术通常包括以下几个步骤：

固定：在一个固定在实验板上的表面上吸附特定的抗原或抗体，从而形成一个固定层。

洗涤：洗去未结合的分子，以减少非特异性结合。

结合：加入待测样本（包含要检测的分子），使待测分子与固定的抗体或抗原发生特异性结合。

洗涤：再次洗涤以去除未结合的分子。

酶标记：加入一个与待测分子特异性结合的酶标记物，如辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）。

产品名称：HRP-Streptavidin，链霉亲和素，HRP标记

中文名称：

HRP标记链霉亲和素

链霉亲和素，HRP标记

英文名称：

HRP-SA

HRP-Streptavidin

分类：蛋白标记

溶解性：/

规格：mg

纯度：95%+

储存：/

用途：科研

相关内容：

秦皮乙素修饰牛血清白蛋白

白藜芦醇偶联牛血清白蛋白

BSA-Resveratrol

白皮杉醇修饰牛血清白蛋白

大豆苷元偶联牛血清白蛋白

Soyptiside-BSA

大豆苷偶联牛血清白蛋白

染料木素偶联牛血清白蛋白

染料木苷偶联牛血清白蛋白

高良姜素偶联牛血清白蛋白

Camphero-BSA

杨梅素偶联牛血清白蛋白

Myricetin-BSA

DMY-BSA

ECG-BSA

表儿茶素没食子酸酯偶联牛血清白蛋白

 EGCG-BSA

表没食子儿茶素偶联牛血清白蛋白

没食子儿茶素偶联牛血清白蛋白

GC-BSA

芹菜素偶联牛血清白蛋白

西安昊然仅用于科研，RL2023.9