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一、胎牛血清FBS介绍
血清为培养细胞*的一部分,它为细胞提供了生长因子及培养所必须的成分。血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
血清类型 | 主要区别(采血时间不同) | 其他区别 |
胎牛血清 (Fetal Bovine Serum) | 母牛怀孕5-8个月时,通过胎牛心脏穿刺采血获取的血清。 | 组份与比例不同:所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎发育所必需的生长因子。一些生长因子到胎牛10个月时就消失了。用途与用法不同:某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可。使用浓度一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。 |
小牛血清 (Newborn Calf Serum) | 是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。 | |
新生牛血清 (Calf Serum) | 采自出生后2周至1年内的小牛静脉取血。 |
目前,常见的血清品牌有:Ausbian、Gibco、Hyclone等。通常有100ml和500ml的规格,可供客户选择。
血清的储存:未拆封的血清,一般情况下应存放于-10℃至-20℃,在产品规定的效期内均可使用,若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内,再放回冷冻。
血清的解冻:将血清从冷冻冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融,或通过水浴锅促使其溶解。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。*溶解后建议尽快使用,若长时间储存在2-8℃,血清中的各种(脂)蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。
我司可为广大科研用户提供多种进口、国产品牌的胎牛血清,还有,细胞培养基、双抗、细胞因子以及细胞培养所需各类耗材。
二、常用的细胞培养基
1、MEM培养基(Minimum Eagle's Medium)
MEM培养基是所有培养基中zui常用的一种,可用于多种悬浮和贴壁生长的哺乳动物细胞,包括 HeLa、BHK-21、293、HEP-2、HT-1080、MCF-7、成纤维细胞和原代大鼠星形胶质细胞。
2、DMEM培养基,Dulbecco 改良 Eagle 培养基(Dulbecco's Modified Eagle Medium)
DMEM培养基是一种广泛使用的基础培养基,可用于支持很多种类的哺乳动物细胞生长。已经在 DMEM 中培养成功的细胞包括原代成纤维细胞、神经元、胶质细胞、HUVEC、平滑肌细胞,以及 HeLa、293、Cos-7 和 PC-12 等细胞系。
3、RPMI-1640培养基(Roswell Park Memorial Institute 1640)
RPMI-1640 培养基被发现适用于多种哺乳动物细胞,包括 HeLa 细胞、Jurkat 细胞、 MCF-7 细胞、PC12 细胞、PBMC 细胞、星形胶质细胞和癌细胞。RPMI 1640 培养基相比其他培养基之所以具有*的效果,是因为其中含有还原剂谷胱甘肽和高浓度的维生素。RPMI 1640 培养基含有生物素、 维生素 B12 以及 PABA,这些成分是 Eagle’s MEM 和DMEM所不具备的。
4、Ham's F-12营养培养基
Ham's F-12 营养混合物 (F-12) 起初设计用于中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞的无血清单细胞铺板。自此之后,F-12 已用于 CHO 培养物的无血清生长以及其他哺乳动物细胞的添加血清生长,包括软骨细胞和大鼠前列腺上皮细胞。与其他基础培养基相比,F-12 含有更广泛的成分,包括锌、腐胺、Hypoxanthine和胸苷。CHO 细胞在 F-12 中的无血清生长催生了各种改良配方。
5、McCoy's 5A(改良)培养基(McCoy's 5A (Modified) Medium)
McCoy's 5 A (改良)培养基是一种通用培养基,可支持多种类型原代细胞、成熟细胞系以及活检组织块的增殖。这种培养基可支持源自正常骨髓、皮肤、脾脏、肾脏、肺、大鼠胚胎及其他组织的原代哺乳动物细胞的生长。Thomas McCoy 博士起初将 McCoy's5 A 培养基配制为基础培养基 5 A 的改良版本。与其他培养基不同,McCoy's5 A 包含还原剂谷胱甘肽、细菌蛋白胨和高浓度葡萄糖。McCoy's 5A(改良)培养基使用碳酸氢钠缓冲体系 (2.2 g/L),因此需要 5–10% CO2 的环境来维持生理 pH 值。
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