β-内酰胺酶是金黄色葡萄球菌和淋球菌等多种细菌产生的一种抗生素灭活酶，能裂解青霉素和头孢菌素等β-内酰胺类抗生素的β-内酰胺环，使其变成无抗菌活性的物质，从而表现为产酶细菌对这类抗生素耐药。由于β-内酰胺酶检测速度快，所以检测β-内酰胺酶与常规药敏实验相比，能更快地获得结果。检测β-内酰胺酶的方法有酸度法和碘测定法。
实验原理：
酸测量法：青霉素被β-内酶胺酶水解后成青霉素酸，pH值下降到6.8以下，用酚红指示剂，由红(紫)色 (原液：枸橼酸缓冲液pH8.5) →黄色(pH6.8以下)；淀粉-碘测定法：β内酰胺酶破坏β内酰胺环，碘与被打开β内酰胺环结合，使蓝色的淀粉-碘复合物转变成无色。β-内酰胺酶是多种不同类型以β-内酰胺类抗菌药物为底物的降解酶，通过水解β-内酰胺环造成β-内酰胺类药物失去活性，将待测菌与头孢硝噻吩作用一定时间后，如待测菌产生青霉素酶，则可水解头孢硝噻吩的β-内酰胺环，颜色由黄色变为红色。
