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小鼠肺癌细胞绿色荧光标记描述
Lewis肺癌是一种从C57BL小鼠的肺中建立的细胞系,该细胞带有原发性Lewis肺癌的植入所致的肿瘤,被广泛用作转移的模型,可用于研究癌症化学治疗剂的机制。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带GFP基因。
细胞特性
1) 来源:小鼠肺癌组织
2)形态:半贴壁生长,混合形态,有上皮细胞样,松散贴壁或悬浮有梭形、圆形等细胞形态 。
3)含量:>1x106 细胞数
4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5)用途:仅供科研使用。
小鼠肺癌细胞绿色荧光标记筛选
该细胞为已经稳定转染GFP的细胞,随细胞传代次数的增加,其GFP荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。建议收到细胞后至少传3代,冻存留种后再进行筛选。
初次进行细胞筛选时,建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的CM培养基维持培养,若无细胞漂浮或者漂浮较少,即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的CM培养基继续筛选,以此类推,至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中,漂浮细胞大于60%,则停止筛选,换成正常培养基培养,至细胞密度约80%,可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖,可停止筛选,用不含药CM培养基正常培养。