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产品名称:土壤硝态氮ELISA试剂盒
OD值偏低由什么因素引起的?
① 整板OD值偏低:
反应温度偏低;
反应时间不够;
洗板时间过长或次数过多;
点板时环境温度过低;
酶标仪故障波长错误;钨光灯寿命将近,导致光强变弱);
试剂盒有效期已过或将过;
某些试剂盒标准品需要稀释才能使用或试剂稀释倍数错误(如四环素类);
试剂盒中的某些试剂变质或污染;
不同试剂盒混用,
试剂盒的回温时间较短;
试剂盒保存未按规定的方法或环境保存;
试剂盒处于该条件下,比如放在贴着冰箱壁,试剂冻伤。
② 样本的OD值偏低:
样本的阳性太高(可做空白样本及阳性样本对照试验),
某些试剂盒的样本需要调节PH的没有调节到需要的PH范围;
某些试剂盒的复溶液需要稀释后才能使用的没有经过稀释;
样本前处理时没有去掉上层有机相,加样吸取到上层有机相;
样本被污染;
样本与标准品的温度相差太多(样本温度低);
样本前处理时使用的水质量不合格;
样本前处理过程中所使用的试剂质量有问题(可做试剂空白对照);
产品名称:土壤硝态氮ELISA试剂盒
ELISA 试剂盒出现的问题及解决方法:
1.脂肪存在为什么会造成试验的假阳性率比较高?
在提取过程中, 容易造成乳化, 对样本进行不正常的浓缩,易与杂质混合难以分离。乳化后一般利用60℃水浴加热半小时,最好是先把上层有机相去除后再利用水浴加热较好.第二种解乳化的方法是把整个乳化后的样本全部放入冰箱-20℃急冻室急冻30min或更长,回温后去除上层有机相再次离心后去上清液,取下层进行分析。
如氯霉素或其他在加入正已烷再加入复溶液进行操作时,可在加入正已烷后充分涡动1-2分钟,然后加入复溶液后涡动5-10s,即可在一定程度上防止乳化造成。又如硝基呋喃类代谢物的前处理中加入乙酸乙酯后形成乳化层,不易取到相应的量,可以在加入乙酸乙酯时,放大加入的量,然后取液相应增加,保证稀释倍数不变,也可在一定程度上防止乳化形成。
2.样品OD值落在药残标准曲线的那一区间值精确度最高?
一般在第三和第四标准之间精确度较高, 但是不同的试剂盒曲线的局部差异, 精确区间会稍有变化。一般在曲线上的近似直线段范围内较为准确.