肠杆菌科和其它非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法）

说明书

【产品名称】

通用名称：肠杆菌科和其它非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法）

英文名称：API 10 S

【包装规格】

50 测试/盒

【预期用途】

用于来源于人体并经过分离培养的肠杆菌科和其它非苛养革兰氏阴性杆菌的鉴定。

该产品用于可导致腹泻、血流感染、尿路感染等的肠杆菌科和其它非苛养革兰氏阴性杆菌的鉴定，临床常见

样本来源有粪便、直肠拭子、尿、血等。

【检验原理】

API 10 S 试验条由 10 个含有干燥底物的微量小管组成。这些测定是用菌悬液接种和复溶培养基。孵育过程

中，所产生的最终代谢产物通过自然反应或加入附加试剂而变色。鉴定结果可根据说明书的判读表进行读出，

也可参照生化谱检索手册或鉴定软件，得到鉴定结果。

【主要组成成分】

试剂盒组成(用于 50 个测试)

- 50 个 API 10 S 试条

- 50 个孵育盒

- 50 张结果报告单

- 1 个 封口夹

试剂条成分

API 10 S 试条的成分请参阅说明书后的结果判读表。

需要但没有提供的试剂和设备

试剂/仪器

- API NaCl 0.85 % 培养基 5 mL（产品号. 20 230）或 API 菌悬液培养基, 5 mL（产品号. 20 150）

- 试剂：TDA （产品号. 70 402）

- JAMES （产品号. 70 542）

- NIT 1 + NIT 2 （产品号. 70 442）

- 氧化酶 （产品号. 55 635*）

* 某些国家不销售，请用相同功能试剂代替

- 矿物油 （产品号. 70 100）

材料

- 吸管或 PSI 管

- 安瓿保护套

- 安瓿架

- 微生物实验室常规设备

【储存条件及有效期】

2～8℃保存，有效期为 18 个月。

API 10 S 试条包装于含干燥剂的密封铝箔袋中。一旦打开（*），未用完试条用密封夹（包含在试剂盒中）将包装袋重新密封，2～8℃可保存 10 个月有效（或至包装盒上的有效期）。

（*）建议开封方法：在封口下方剪开铝箔装，为防止意外损坏干燥剂，开封时应保持铝箔袋垂直。

生产日期：详见外包盒标签。

有效期至：详见外包盒标签。

【适用仪器】

- apiweb TM 鉴定软件（产品号 40 011）

- 微生物实验室常规设备。

【样本要求】

API 10 S 不能直接用于临床或其他标本（如如血样、尿样和粪样、直肠拭子等等）。被鉴定的微生物必须首先根据标准的微生物技术在适当的培养基上进行分离。

【检验方法】

氧化酶试验

 严格按生产商使用说明做氧化酶试验并将结果记录在结果报告单上（第 11 个鉴定试验）。

试条的准备

• 准备一个培养盒（盘和盖子），倒入约 5mL 蒸馏水或软化水【或其它不含任何添加剂或能产生挥发性气体的化学物质的水（如 Cl2, CO2,等）】于盘的蜂窝小凹中，造成一个湿室。

• 在盘的长边写上菌株编号（不要写在盖子上，因为操作过程中很容易将盖子放到其它试条上）。

• 从包装袋中取出试条。

• 将试条放入培养盒中。

注：API 10 S 只适用于肠杆菌科和/或非苛养 G－杆菌鉴定。对营养有特殊要求并需必要防护措施的苛养菌（布鲁氏菌 Brucella 和弗朗西丝菌 Francisella）不包括在 API 10 S 数据库中，需用其他方法鉴定。

接种物的制备

• 按照产品说明书中“警告和注意”的相关部分，打开一个 API NaCl 0.85%培养基安瓿（5mL）或一个 API 悬浮培养基（5mL），或用不含任何添加剂的无菌生理盐水或灭菌蒸馏水（5mL）。

• 用吸管或 PSI 管，从分离平板上取单个菌落。推荐使用 18~24 小时培养物。

• 仔细乳化成均匀的细菌悬液。

菌悬液制备好后须立即使用。

注 : 大多数弧菌属嗜盐菌。如怀疑为弧菌，则应用 API NaCl 0.85%培养基制备菌悬液。

试条的接种

• 用同一只吸管，将菌悬液加入试条的管中（为避免在管底形成气泡，将试条轻微向前倾斜并把吸管或 PSI管紧靠小杯边缘以避免在管部形成气泡）。

• CITE 试验，充满管和杯。

• 其他试验菌液只加入管（不加入杯）。

• 在试验 LDC, ODC, H2S 和 URE 小杯内加入矿物油形成新月形凸起以保证厌氧环境。

• 盖好培养盒盖。

于 36°C ± 2°C 孵育 18～24 小时。

试条的判读

• 孵育后，根据结果判读表判读所有反应。

• 记录全部结果于结果报告单上。

• 需加附加试剂的试验：

- TDA 试验：加一滴 TDA 试剂。显示红褐色为阳性反应。

- IND 测试：加一滴 JAMES 试剂。整个杯显粉红色为阳性反应。

- NO2试验: 在 GLU 试验中各加入一滴 NIT 1 和 NIT 2 试剂，等待 2 到 5 分钟。红色为阳性反应。

注：硝酸盐还原试验和吲哚试验必须最后做，以免这些反应释放的气体干扰其他试验的结果判断。加完附加试剂后注意不要再盖盖子。

解释

鉴定结果根据数值编码获得。

• 数值编码的确定：

在结果报告单，每 3 个试验为一组，每组的阳性反应分别赋予 1、2 或 4 的数值，将每组数值相加得到一个 4位数字的编码。

• 鉴定：

鉴定结果是根据数据库 (V3.1)得到。

* 依据数值编码：

-从检索手册中查找数值编码。

* 依据 apiwebTM 鉴定软件：

-在键盘上输入 4 位数字的数值编码