革兰氏阳性细菌鉴定卡说明书

【产品名称】

通用名称： 革兰氏阳性细菌鉴定卡

英文名称：VITEK 2 Gram-Positive Identification card (VITEK 2 GP Test Kit)

【包装规格】

20 测试/盒

【预期用途】

用于来源于人体并经过分离培养的常见具有临床意义的革兰氏阳性菌的自动鉴定。

【检验原理】

GP鉴定卡基于已建立的生化方法2、3、7、8、9、10、11、14、20、21、22、23、27、32、37、39及新开发的底物，

共有检测碳源利用、酶类活性和耐药性的 43 种生化试验。最长约需要8小时获得最终鉴定

结果。

【主要组成成份】

详见“附表 1 革兰氏阳性细菌鉴定卡 GP 卡各孔成分”。

【储存条件及有效期】

原包装袋内密封储存于 2～8℃。有效期 18 个月。

生产日期：详见外包盒标签。

有效期至：详见外包盒标签。

【适用仪器】

全自动微生物鉴定及药敏分析仪（VITEK 2 System）型号：VITEK 2， VITEK 2 XL

全自动微生物鉴定及药敏分析系统（VITEK 2 Compact System）型号：VITEK 2 Compact

与 VITEK® 2 仪器一起使用时，GP 卡是一个用于常规鉴定大多数具有临床意义的革兰阳

性细菌的完整系统。需要的材料有：

 VITEK 2 GP 卡

 电子比浊仪（VITEK® 2 DensiCHEK™ 或 VITEK® 2 DensiCHEK™ Plus kit）

 电子比浊仪标准浊度管（DensiCHEK™ Plus standards kit）

 VITEK 2 卡架

 样本稀释液（0.45%～0.50%NaCl，pH 4.5～7.0）

 12 mm x 75 mm 透明塑料（聚苯乙烯）一次性试管

 无菌棒或拭子

 合适的琼脂培养基（参阅附表 2 培养要求表）

可选配件：

 容积可调式盐水分配器

 接种环

 预装样本稀释液的试管（0.45%~0.50%NaCl 溶液，pH4.5~7.0）

 试管帽

 涡旋震荡器

【样本要求】

参阅“附表 2 培养要求表”获取样本准备信息。

【检验方法】

见适用仪器使用手册。

警告：未遵守本部分有关执行实验室任务的说明和建议，可能会导致结果错误或延迟。

欲详细了产品具体信息，请参见培养要求表。

注：根据实验室操作规范，用纯培养物制备接种物。如果是混合培养物，则需要重新分离。建议使用菌纯度确认平板，以确保用于试验的是纯培养物。

1） 如果符合培养要求，从原代培养板上选择分离的菌落；或者将要测试的细菌转移至适当的琼脂培养基上传代培养和相应孵育。

2） 以无菌方法，将 3.0 mL 无菌盐水（0.45%至 0.50%NaCl 溶液，pH4.5 至 7.0）加入一个透明的塑料（聚苯乙烯）试管（12mm×75mm）中。

3） 使用无菌棒或拭子接种形态相同菌落至第二步中准备的盐水试管，使用经过校准的电子比浊仪 VITEK 2 DensiCHEKTM Plus 制备相当于麦氏浊度 0.50～0.63 均质菌悬液；

注：接种卡片前，菌悬液配制后放置时间不得超过 30 分钟。

4） 将菌悬液试管和 GP 卡放入卡架中。

5） 参阅适当的仪器使用手册，了解数据输入说明和如何向仪器中装载卡架；

6）丢弃危险性废物时请遵循所在地监管机构的指南。

质量控制

质量控制细菌及其预期结果列在 VITEK® 2 GP 质量控制表中。根据本文件中规定的试验菌株操作质量控制。

认证声明

兹此证明，bioMerieux 符合 ISO 13485 和 FDA 质量体系规范 (QSR)关于微生物鉴定系统设计、开发和制造的要求。

1、试验频率

目前，建议遵循监管机构有关鉴定产品试验频率的指南。通常做法是，在收到试剂盒时实施 QC。反应必须符合说明书结果。

如结果不符合标准，传代纯化之后重复试验，如结果仍然不符合标准，采用其它鉴定方法，并联系 bioMerieux。

2、质控菌试验和储存

 依厂商说明复溶菌株；

 采用含 5% 羊血的胰酶大豆琼脂（TSAB），在 35°C 至 37°C 和 5% 至 10% CO2 条件下培养大约 18 至 24 小时。

 检查纯度。实施第二次传代培养，以便试验。

 采用含 5% 羊血的胰酶大豆琼脂（TSAB），在 35°C 至 37°C 和 5% 至 10% CO2 条件下培养大约 18 至 24 小时。

3、储存条件

短期保存条件

1） 传代至 TSAB 琼脂或斜面；

2） 在 35°C 至 37°C 和 CO2 浓度为 5% 至10% 条件下孵育 24 小时。

3） 在 2°C 至 8°C 下冷藏最长两周。

4） 按上述要求传代培养一次，以便用于质控。

长期保存条件

1） 用 含 15% 甘油的胰酶大豆肉汤（TSB）配制浓菌悬液。

2） - 70℃冷冻保存；

3） 质控前在 TSAB 上传代两次。

注：避免反复冻融，把冷冻保存菌株分装为单份使用或用无菌涂布棒从冷冻保存的菌中取出少部分使用。

精简质量控制

注：只限工业使用的实验室应该遵循精简质量控制部分中的内容实施质量控制。这些用户无需额外试验。

因为不含在运输条件下容易降解的底物，可以通过试验两个菌株实施精简质量控制：一个在GP 卡上反应大多数情况是阳性，另外一个在 GP 卡上反应大多数情况是阴性。（请参见 GP质量控制表了解详情。）

全面质量控制

不符合精简质量控制测试要求的客户，需要实施全面质量控制试验，以便证明针对某鉴定产品每种底物的阳性和阴性反应。

欲在开始就符合精简质量控制测试要求，CLSI® M50-A 标准要求用户实施和记录以下两项中的一项：

• 完成验证试验，以证明其性能符合制造商声称的性能。

• 实施全面质量控制测试，应该在至少三个不同季节至少对三批产品实施。

请参阅完整的 CLSI® M50-A 标准，了解如何保持符合要求，以及精简质量控制测试对于用户和制造商双方的要求和责任。

GP 卡质量控制表：

Enterococcus casseliflavus 铅黄肠球菌 ATCC® 700327™（用于精简或全面质量控制）

Streptococcus salivarius ssp. thermophilus 唾液链球菌嗜热亚种 ATCC® 19258™（用于全面质量控制）

Kocuria kristinae 克氏库克菌 ATCC® BAA-752™（用于全面质量控制）

Listeria monocytogenes 单核细胞增多李斯特菌 ATCC® BAA-751™（用于全面质量控制）

Streptococcus pneumoniae 肺炎链球菌 ATCC® 49619™（用于全面质量控制）

Staphylococcus saprophyticus 腐生葡萄球菌 ATCC® BAA-750™（用于精简或全面质量控制）

Staphylococcus sciuri 松鼠葡萄球菌 ATCC® 29061™（用于全面质量控制）

Streptococcus equi ssp. zooepidemicus 马链球菌兽瘟亚种 ATCC® 43079™（用于全面质量控制）

Enterococcus saccharolyticus 解糖肠球菌 ATCC® 43076™（用于全面质量控制）

鉴定质量控制细菌时，GP 卡的结果通常是单选，或在低分辨率或相似细菌鉴定结果内。但质控菌株的选择是基于反应性能而非鉴定性能。因此，在所有预期的反应均正确时，可能会出现不能鉴定或鉴定错误的结果。