基因电转染仪技术由以下两部分组成
时间:2022-10-18 阅读:177
在大多数情况下,将基因转染进入有丝分裂后期的神经细胞(如原核脑皮层核海马趾神经细胞)被证实是无效的。其他转染方法如磷脂钙/DNA共沉淀法、阳离子脂质体法或显微注射法等对神经细胞都是有毒的,他们通常导致被转染的细胞存活率不到10,。经改良后的病毒转染法,如腺病毒核Semilki forest病毒具有较高的转染率,单病毒载体的构建是耗时的、并且伴有不安全的担忧,病毒感染有可能感染蛋白质的合成,更有甚者,由于病毒转导后蛋白表达的水平太高。
基因电转染仪技术由两部分组成:
1.转染过程中,细胞首先悬浮在转染试剂中,选择相应的转染程序,仅需数秒钟,转染结束,将细胞转移到培养基中培养、观察。针对不同的转染细胞都有相应的转染试剂,配合相应Amaxa转染仪的程序,使DNA直接转入细胞核内,转染效率高,易操作,实验周期短。
2.原理是基于细胞特异性的细胞核转染液和电穿孔技术的结合。
细胞特异性的细胞核转染液为外源基因进入细胞核提供友好界面,降低转染过程对细胞的损伤。转染技术有一般的电穿孔无法对比地优点,它具有电子参数,每一套电子参数是作为一种程序去适应不同的细胞类型。由于电子参数是预先精心设计好的,因此操作者不用进行电子参数的优化、转染条件的摸索等繁琐的工作,您只需按动按钮选用规定的程序即可。
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