在上期内容中，我们重点为大家介绍并推荐了适用于中草药检测的各类安捷伦色谱柱，以便大家在日后的检测工作中匹配使用。本期继续带来适用于车前子配方颗粒检测的色谱柱推荐，跟上我们，精彩继续！

本实验选用的色谱柱 InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 采用 Agilent 专有的表面多孔型填料技术, 其 2.7 μm 色谱柱的分离速度和分离度能媲美亚二微米全多孔类型的色谱柱，但柱压仅有其一半。同时柱头采用较大的 2 μm 筛板能耐受更“脏”的样品，有利于提高色谱柱的耐受性。特征谱图采用的 Poroshell 120 EC-C18(2.1x100mm, 2.7μm) 色谱柱，测试结果*符合标准的规定。

根据国家药品监督管理局 《国家药品标准》中车前子配方颗粒的检测项目，对其特征谱图和含量测定都采用超高效液相色谱法。特征谱图测定中要求理论板数按京尼平苷酸峰计算应不低 3000，供试品呈现的特征峰保留时间应与对照品相对应。含量测定中规定了理论板数按京尼平苷酸峰计算应不低于 3000。本文采用 Infinity 1290 超高效液相色谱仪以及 InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 2.1x100mm, 2.7μm 色谱柱对车前子配方颗粒的特征谱图进行了分析，并对车前子配方颗粒中京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的含量进行了测定。此外，我们也对该方法进行了加速，能够实现更快速的分析。

1、 特征谱图

色谱条件：  

标准方法：  

流动相：A：CH3OH；B：0.3%醋酸水  

梯度：0-0.2min，95%B；0.2-8min，95%B-40%B；8-10min，40-95%B；10-15min，95%B  

流速：0.3ml/min  

柱温：30°C  

检测波长：245nm(4nm),Ref:off;采样频率：20Hz  

进样量：2μL  

加速方法：  

梯度：0-0.1min，95%B；0.1-4min，95%B-40%B；4-5min，40-95%B；5-7.5min，95%B  

流速：0.6ml/min  

其余同上。

结果

1）使用Poroshell色谱柱，能准确定位供试品中的4个特征峰；供试品色谱图中，未出现与车前子苷对照品参照物峰保留时间一致的色谱峰。

2）标准方法和加速方法的理论板数按京尼平苷酸峰计算分别为 38475 和 37988，大于规定值 3000，结果符合要求。

3） 使用加速方法加速分析后，分析时间缩短 7.5 分钟(50% 时间节省)。

2、 含量测定

色谱条件：

标准方法：  

流动相：A：CH3OH；B：0.5%醋酸水  

梯度：0-0.2min，95%B；0.2-10min，95%B-40%B；10-10.1min，40-95%B；10.1-15min，95%B  

流速：0.3ml/min  

柱温：30°C  

检测波长：245nm(4nm),Ref:off;采样频率：20Hz  

进样量：2μL  

加速方法：  

梯度：0-0.1min，95%B；0.1-5min，95%B-40%B；5-5.05min，40-95%B；5.05-7.5min，95%B  

流速：0.6ml/min  

其余同上。

结果

1）使用该方法测定京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的含量，京尼平苷酸的理论板数符合标准中的规定。

2）通过提高一倍流速，可加速分析方法，分析时间缩短至 7.5 min(50%时间节省)。

实验结论

本实验选用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 色谱柱对车前子配方颗粒特征谱图及含量进行了检测，均符合标准中对系统适用性的要求。本方法可用于车前子配方颗粒的分离和检测，为该配方颗粒的质量保证提供检测依据。

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