牛乳是重要的营养物质，其中包含的蛋白质主要分为酪蛋白 (CN) 和乳清蛋白两种，且酪蛋白占 80% [1]。牛乳中的酪蛋白主要包括 4 种亚型：αS1-CN、αS2-CN、β-CN 和 κ-CN，其中 β-CN 约占 CN 的 40%[2]。迄今为止已发现牛乳中含有 10 余种 β-CN 变异体，其中最主要的两种是 A1β-CN（以下简称 A1 蛋白）和 A2β-CN（以下简称 A2 蛋白）[3]。A1 蛋白和 A2 蛋白的唯一区别在于其一级结构的第 67 位氨基酸不同：A1 蛋白的第 67 位氨基酸为组氨酸，而 A2 蛋白的第 67 位氨基酸为脯氨酸[4]。尽管这两种酪蛋白的差别细微，但在人体内消化后会产生不同的生物活性肽[5]。研究表明，A1 蛋白产生的 β-酪啡肽-7 可诱发多种疾病，而 A2 蛋白则不产生 β-酪啡肽-7[6]。因此，开发一种分离并检测 A1 蛋白和 A2蛋白的方法具有重要意义。