磁珠提取实时荧光定量PCR怎么实现一次检测多种目的基因?
时间:2022-08-28 阅读:232
磁珠提取实时荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,而反之就不行了,况且这样代价太大了,一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的功能不能互相取代。
一般来讲PCR升降温速度越快,实验需要的时间越少。需要的时间越少,意味着在中间温度可能产生的非特异扩增越少。并且,通常升降温速度,也从侧面体现了仪器控温能力的好快。
PCR仪就价格来看,每秒变温越多(现在主流的是每秒4到7摄氏度),价格就越高,仪器越好。主要因为加热模块材质的差别。在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。
其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。
磁珠提取实时荧光定量PCR仪有单通道,双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,实现一次检测多种目的基因的功能。