Cellix微流控泵 Cellix提供用途各异的微流控泵。普通注射泵用于微流控生物芯片时常出现流动不平稳的现象,Cellix采用有的技术,有效消除了脉动现象,使得流动非常平稳,并实现了主动流量控制以j确投送样品。Cellix泵即可进行单流道实验,又可用于多流道实验,而且在进行多流道实验时,各流道之间的流动可保持相互立。Cellix泵简单、易用,可通过iPad、iPod及笔记本电脑进行控制,是进行微流控、流体剪切、样品混匀和细胞培养研究的理想选择。 1、ExiGoTM泵 系统简介 ExiGoTM泵是一种可由iPad mini和LabVIEW接口进行控制的注射泵。ExiGoTM多支管是一种微流体流道选择器。二者通常配套使用,通过控制程序可以在三个流道之间进行j确的切换,减少了死体积,性能越。
系统特点 集成了流动传感器,通过主动反馈来j确控制流量 流量范围:10 nL/min - 20 mL/min 标准注射器:100μL - 5mL 具有清洗模式和可编程灌注模式(恒定型、截流型、步进型、正弦型),方向可逆 不同流动模式间切换速度快(ms) 能长时间稳定运行 WiFi通讯,通过iPad mini多能同时控制4个泵立运行 也可通过USB线连接笔记本电脑上,用LabView软件进行控制 可通过标准的管路连接任意微流控生物芯片
应用范围 微纳流体、微滴生成和操纵、平稳流动、(多)层流研究、多流道混合、对细胞进行流体剪切刺激、细胞及颗粒操纵 2、UniGo注射泵 系统简介 UniGo™微流控注射泵是一种能j确控制流量的单流道压力泵,在微流控研究中有着广泛的应用。本泵主要依靠注入空气来产生压力,推动注射器单向前进。UniGo™泵配有即插即用的流体传感器来实现主动反馈,增加了流体控制能力。自带的控制软件可同时操纵四台UniGo™泵,并且可对各个泵进行立编程。UniGo™泵与ExiGo™泵连用可使微流控实验设计更加灵活。
系统亮点 两种运行模式:手动流量控制和预编程流量控制(恒定型、截流型、步进型、正弦型) iPad mini软件通过Wi-Fi进行控制,也可通过USB线连接笔记本电脑上,用LabView软件进行控制 触控电源 LED显示电源和运行状态信息 可四泵连用 流量范围:1 μL/min – 1 mL/min
3、4U四流道泵 系统简介 4U™微流控注射泵是一种能j确控制流量的四流道压力泵,在微流控研究中有着广泛的应用。本泵主要依靠注入空气来产生压力,推动注射器单向前进。自带的控制软件可同时操纵四个流道,并且可对各流道进行立编程。
系统亮点 两种运行模式:手动流量控制和预编程流量控制(恒定型、截流型、步进型、正弦型) iPad mini软件通过Wi-Fi进行控制,也可通过USB线连接笔记本电脑上,用LabView软件进行控制 触控电源 流量范围:1 μL/min – 1 mL/min
4、KIMA微流控泵 系统简介 KimaTM泵是可循环的微流控泵,由iPod Touch进行控制。
系统亮点 可置于孵箱内运行 长时间循环灌注 具有清洗和灌注两种运行模式 流量范围:15 - 35mL/hr ± 4% 死体积< 300μL iPod Touch通过WiFi通讯可同时控制四台泵 配有各种尺寸的软管,可连接多种微流控生物芯片
应用范围 对细胞施加流体剪切刺激、生物膜研究、贴壁细胞(HUVECs,stem cells, HepG2 cells等)生物芯片培养 5、MIRUS EVO NANOPUMP微流控泵 系统简介 MirusTM Evo Nanopump是一种通过VenaFluxAssay软件进行控制的微流控注射泵
系统亮点 通过MultiFlow8将流体平均分配至8个流道,并行检测,通量更高 每个流道均有一个閥门,可自由开关 采用技术,减轻了注射泵的震动,流量控制更加准确 流量范围:100nL/min - 10mL/min ± 1% 标准注射器型号:50μL - 5mL 死体积约600μL 流动方向可逆 通过VenaFluxAssay电脑软件进行控制 在没有MultiFlow8的情况下也可立使用
应用范围 微流控研究、单细胞分析、生物芯片中对细胞施加流体剪切。适用于细胞样品和血样品。 6、微流控泵传感器 系统简介 Cellix微流控泵传感器可对流量进行主动反馈,实现了j确稳定的流量控制,与ExiGo™, UniGo™ and 4U™兼容。
系统亮点 主动反馈和PID(比例、积分、微分)控制 流量j确 测量范围:±1,500 nL/min (1.5 μL/min); ±7,000 nL/min (7.0 μL/min); ±80,000 nL/min (80.0 μL/min); ±1 mL/min
应用范围 需要严格控制流量的微流控实验
Cellix生物芯片 1、DROPCHIP 系统简介 DropChip芯片含有三个微滴产生器和一个分流器(分流水、油等连续相),与ExiGo微流控泵配套使用,可用于产生微滴。
系统亮点 可重复使用 通过控制流道尺寸、流量、油的种类、表面活性剂类型和浓度可产生不同的微滴
应用范围 高通量产生微滴和单分散性乳液 2、VENA8 FLUORO+生物芯片 系统简介 Vena8 Fluoro+TM生物芯片适用于研究细胞在包被有蛋白的基底或单层培养的细胞上的滚动和粘附,在血栓形成和血检测中有着重要的应用,可用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜进行观察。
系统亮点 流道尺寸(H x W x L)为100 μm x 400 μm x 2.8 cm 可用于活细胞和固定细胞的免疫荧光染色 样品用量少,适用于血、原代细胞、稀有细胞(如样本来源稀缺或难以培养的细胞) 适用于高流速、高切应力下的研究,如血小板粘附、血栓聚集和形成。普通流动腔因为需要大量的血而难以进行研究 操作简便,无需装配,一次性使用
应用范围 小样本检测(血、细胞悬液、蛋白质)等;荧光显微镜和激光共聚焦显微镜检测。 3、VENA8 ENDOTHELIAL+生物芯片 系统简介 Vena8 Endothelial+适用于流体剪切下细胞在包被有蛋白的基底或单层培养的细胞上的滚动和粘附的研究,可用明场、相差显微镜和荧光显微镜进行观察。收集的样本可用于PCR检测。
系统亮点 流道尺寸(H x W x L)为120μmx 800 μmx 2.8 cm 流体剪切下细胞滚动和粘附测试 可收集流道中培养的细胞(多达320,000个)用于后续检测,如PCR等。 样品用量少,适用于血、原代细胞、稀有细胞(如样本来源稀缺或难以培养的细胞) 操作简便,无需装配,死体积小(约0.1 μL)
系统应用 小样本检测(血、细胞悬液、蛋白质)等;明场、相差显微镜、荧光显微镜检测。 4、VENAT4-趋化、跨膜迁移、浸润检测芯片 系统简介 VenaT4™芯片适用于趋化、跨膜迁移、浸润检测芯片,可用明场、相差显微镜和荧光显微镜进行观察。
系统亮点 流道尺寸(H x W x L)为100 μm x 800 μm x 2.8 cm 模拟生理环境,细胞在流体剪切环境下粘附至多孔膜(2-10 μm孔径)上,然后跨膜迁移至含有趋化因子的microwell中 兼容多种胞外基质,如胶原、水凝胶、matrigel等 细胞也可培养的microwell中 距离小,比传统的趋化性检测更快 样品用量少,适用于血、原代细胞、稀有细胞(如样本来源稀缺或难以培养的细胞) 操作简便,无需装配,死体积小(约0.1 μL)
系统应用 趋化、跨膜迁移、浸润实验及明场、相差显微镜和荧光显微镜观察 5、VENA8芯片 系统简介 Vena8芯片有8条平行流道,可包被蛋白和接种细胞,然后研究流体剪切下药物相互作用、进行显微观察或分子生物学检测。基底为玻璃盖玻片,可单提供也可固定于芯片上。盖玻片可进行无菌处理并包被高密度PEG,也可不做任何处理。流道表面也易于包被蛋白。
系统亮点 流道尺寸(H x W x L)为160 μm x 1600 μm x 2.8 cm 既适用于低剪切力研究,又适用于高剪切力研究 样品用量少,适用于血、原代细胞、稀有细胞(如样本来源稀缺或难以培养的细胞) 适用于高流速、高切应力下的研究,如血小板粘附、血栓聚集和形成。普通流动腔因为需要大量的血而难以进行研究 适用于生物膜研究,使用者可在芯片底部固定各种类型的生物膜 操作简便,无需装配,死体积小
应用范围 小样本检测(血、细胞悬液、蛋白质)等;荧光显微镜和激光共聚焦显微镜检测。 6、VENADELTAY1和VENADELTAY2芯片 系统简介 VenaDeltaY1™ and VenaDeltaY2™芯片含有分支微流道,适用于双流体/双注射样本,是研究化学梯度、双流动、多层流和扩散的理想选择。
系统亮点 流道尺寸(H x W x L)为(100-120)μm x(400-800)μm x 2.8 cm 可用于明场、相差显微镜和荧光显微镜观察 样品用量少,适用于血、原代细胞、稀有细胞(如样本来源稀缺或难以培养的细胞) 操作简便,无需装配,死体积小 可灭菌和重复使用
应用范围 化学梯度、双流动、多层流和扩散研究
细胞分析软件 1、DUCOCELL细胞分析软件 软件简介 DucoCell是一种图像分析软件,可以用于细胞计数和形态测量。
软件亮点 自动检测和计数 分析参数多样,可分析细胞面积、直径、规化形状因子、椭圆度、偏心距、方向、周长、不对称性、形心、椭圆轴等 可根据细胞形态参数筛选子群体 数据可导入Excel表,并自动产生图表
2、IMAGE PRO PREMIER细胞分析软件 系统简介 Image Pro Premier细胞图像分析软件可分析细胞形态、细胞运动录像和微速摄影录像。
系统亮点 捕获:快速捕获单帧图像 处理/分析:自动对齐并且扩展景深;比较图像;提取和合并颜色通道;三维重建图像;编辑录像;图像批处理 测量/定量:强度测量、边缘检测和分析、目标跟踪 计数/分类:分析目标的空间分布、对目标进行分类、测量目标内部的小目标 结果报告:注释和拷贝图像、出具pdf/word/ppt/excel格式的结果报告、记录工作步骤等
自动化平台 1、INISH便携式血液分析 系统简介 Inish便携式血液分析可用于细胞和粒子分析,能在60秒内得到结果,部操作只有三步,易于操作且可以避免污染。
系统亮点 便携式(16.1 x 9.4 x 8.3;41 x 24 x 21 cm两种规格)、低成本 灵敏度与流式细胞仪相同,结果可靠,用BD’s Accuri和Sysmex XP-300进行过校准
系统应用 分析血液中红细胞和白细胞亚群 病人身边检测、急诊、野外(如战场)检测、诊室检测
2、VENAFLUX平台 系统简介 自动化微流体平台,可进行流体剪切下细胞滚动、结合/粘附和迁移的研究。
系统亮点 系统稳定,易用 可使用血进行血小板粘附、聚集和血栓形成研究;长时程观察细胞在生物膜上的生长 同时进行多个体外实验,以与利用动物模型进行的体内实验相对比
系统应用 细胞-配体和细胞-细胞相互作用研究 细胞粘附和迁移的形态学分析 跟踪细胞 可获得IC50(半抑制浓度)曲线 预临床药物开发和化
应用实例 微流体设备 活细胞观察生物芯片
微流控生物芯片可以模拟体内毛细血管的结构,是进行活细胞成像观察的得力工具。和传统的玻璃毛细管相比,生物芯片具有一些显著点,无光学畸变现象,分辨率高,在明场、相差显微镜和激光共聚焦显微镜下均可观察(图1A)。流道内可以包被粘附分子和培养不同的细胞,用于研究细胞滚动、粘附、迁移、浸润、跨膜(图1B)等过程,用法非常灵活。 图1 Cellix微流体实验平台及其应用 细胞和颗粒操纵
在物理、化学和生物学研究中经常需要操纵细胞和颗粒。膜片钳、生物芯片、光镊、磁镊、声镊、水动力学和介电流方法都是常见的操纵方法。Cellix主要用于生物芯片、水动力学和磁镊等方法中。 微滴产生和操纵
j确地控制生物芯片中的液体流动可以产生所需的微滴。在封装、化学合成和生化检测中经常会用到微滴。应用生物芯片产生微滴时要求芯片具有T形喷嘴和聚焦成像设备。Cellix提供各种型号的此种芯片,与ExiGO泵连用可以产生各种微滴(图1)。 图1 DropChip生物芯片制作微滴。 快速切换与物质输送
微流控实验对流体操纵和控制的j确要求j高,在不同的流体样本之间快速切换是成功进行许多实验(如微滴产生)的关键。Cellix的ExiGo注射泵精度j高,方便携带且使用简单,可同时运行四台立的注射泵,在低流量情况下也能保证精度。ExiGo泵可实现步进、截流、线性和正弦波形,通过配套的流量传感器进行反馈控制,保证了运行精度。 下图为三台ExiGo泵(图1A)之间的快速切换,切换频率为2 s,图中不同颜色是溶解有不同颗粒的液体(图1B,C)。 图1 利用ExiGo泵进行多层流之间的切换。通过三台ExiGo泵(A)快速切换,三层流动(B)转换为了两层流动(C)。 水力聚集
水力聚集是在微流体混合、分离、阻抗传感器和流式细胞仪中广泛采用的技术。水力聚集有很多种实现方法,生物芯片是其中的一种。通常情况下,生物芯片具有三个流体入口,样品流位于中央,可以被两侧更快的流动所形成的鞘液聚集。ExiGo泵可实现此功能(图1)。 图1 水力聚集 层流研究
层流是流体规律的运动形态,层流中各点运动方向均与流动方向相同。在这种情况下,由扩散导致的侧向混合非常慢。毛细胞血管中的血液流动和微流控芯片中的流动均可视为层流。层流研究可以更好地理解人类微循环规律,并有助于开发出微尺度上操纵流体的新方法。作为一个例子,图1展示了如何利用截流来实现粒子向特定流道的运输。 图1 ExiGo泵实现粒子定向运输。两台ExiGo泵连用(A),其中一个为截流,另外一个则可将粒子运送至特定的通道(B)。
细胞生物学 血小板粘附和聚集
使用Cellix微流体泵和生物芯片可以很容易地研究血小板、聚集和血栓形成。生物芯片具有多种结构,可以模拟毛细血管,重现了生理微环境。使用微流体设备的另外一个点是减少了样品用量。通常,经过抗凝处理后的血液在2-3个小时之后也会凝固,研究人员必须在这段时间内完成研究,这就要求研究要很快,且通量要高。在8流道的芯片中包被血管性血友病因子、胶原、纤连蛋白或其它蛋白后,利用Mirus Exo泵可以同时进行8个实验。Cellix Vena8 Fluroro+芯片就是这样一种芯片,可以用激光共聚焦显微镜进行成像,在流体剪切下血小板滚动、粘附、聚集、与内皮细胞相互作用和抗凝血研究中得到了广泛的应用(图1、2)。 图1 血管性血友病因子(VWF)与胶原包被底板上血小板的粘附。 图2 前列腺素E2受体EP4的表达抑制血小板聚集和血栓形成。在胶原包被的流道中,经过不同处理的血(A)血小板聚集发生了变化(B)。 细胞滚动、粘附和迁移
细胞沿着血管壁的滚动、粘附和迁移是细胞进行信号转导的重要步骤,与炎症反应和癌症、心血管疾病、感染和呼吸系统疾病(如哮喘)的治疗密切相关。使用Cellix微流体泵和芯片可以很容易地研究这些过程。Cellix八流道Mirus Evo泵可以同时进行进行八个实验,ExoGo泵则适合进行单个实验。Cellix芯片的流道内可以包被选择素、VCAM/ICAM/MadCAM等粘附分子、MCP-1、趋化因子及其它蛋白。使用Kima泵还可以培养内皮细胞(如HUVECs,HMVECs,HLMECs),进而研究细胞间相互作用(图1)。 检测类型: 细胞滚动、粘附和迁移 T细胞,B细胞,血小板,白细胞,外周血单核细胞,嗜酸性粒细胞与内皮细胞或配体相互作用 抗炎治疗
图1 粘附分子的表达水平会影响流体剪切条件下THP1与HUVECs的粘附。 趋化作用、跨膜迁移和浸润实验
在癌症和心血管疾病的产生过程中,细胞通过感知趋化分子而粘附到血管壁上,然后通过跨膜穿过内皮细胞层浸润至特定组织。Cellix产品有助于这些过程的研究,利用Cellix注射泵和生物芯片,可以研究细胞的趋化、跨膜迁移、浸润、癌症和心血管疾病疗法及细胞间相互作用(图1)。 图1 流体剪切与化学诱导刺激下黑色素瘤细胞在VenaT4芯片中的转移。1205-Lu GFP细胞经受0.5 dyne/cm2流体剪切刺激6 min (A)与30 min (B)相比,细胞跨膜迁移能力增强,且在含有化学诱导试剂的情况下细胞跨膜迁移能力也增强(C)。 生物膜形成
细菌粘附在基底表面并且克隆化是形成生物膜的步,这会影响植入式医疗设备的效果并导致一些疾病。生物膜对宿主的免疫系统、机械清除和抗生素都有抗性。因此,阐明细菌增长的生理环境和机制非常重要。使用Cellix微流体泵和生物芯片可以模拟心血管、各种表面和肠内生物膜形成的生理微环境。例如,研究人员可以在Vena8生物芯片底部粘上玻璃基底或其它感兴趣的材料来密封流道,然后将含有不同物质(如抗生素)的溶液流过,以研究剪切力或抗生素对基底上形成的生物膜的影响(图1)。 图1 流体剪切促使大肠杆菌由滚动向粘附状态转变。 5、心血管:动脉粥样硬化、药物支架 动脉粥样硬化是一种慢性炎症,是心脏病和中风的主要诱因。动脉粥样硬化的特征是在血管壁上不断积累脂质,淋巴细胞在血管壁上的募集和向内膜的迁移是这种病理过程的核心事件。血管内支架的作用是保持动脉畅通,维持正常的血流状态。药物支架是一种新型支架,可以降低再狭窄的发生率,它由金属支架及其上包被的多聚物膜组成,多聚物膜可以缓释阻断炎症反应和细胞增殖的药物,降低了术后血管愈合时组织的过度生长。Cellix化了一系列微流体设备,使其更加适于研究血液与药物支架的相互作用(图1)。 图1 利用Vena8生物芯片研究不同的药物缓释系统对血小板在纤连蛋白包被基底上的聚集能力的影响。系统C具有好的稳定性和抗聚集能力。 6、呼吸(哮喘和慢性阻塞性肺病) 哮喘是发展中国家常见的一种慢性呼吸疾病,目前主要使用内吸式糖皮质激素来控制哮喘症状。嗜酸性粒细胞是哮喘肺中主要的炎症细胞,它们释放的胞内物会对损害呼吸道上皮,造成呼吸障碍。嗜酸性粒细胞在血管内皮的粘附和跨膜在哮喘的发病过程中起着重要作用。孟鲁斯特(MLK)是一种新型的平喘药,通过拮抗cysLT1R来减少嗜酸性粒细胞的迁移。MLK还具有抗炎作用,利用Cellix生物芯片可以方便地对此进行研究(图1)。 图1 在2 dyne/cm2流体剪切刺激下,经过100 nM MLK处理后,嗜酸性粒细胞明显减少了在rhVCAM-1包被的基底上 |