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TelePhOto:无线光度测量和光遗传学
TeleFiOpto 可以以无线方式同时进行光纤光度记录和光遗传学刺激。在纤维插管之前,应通过在目标处注射两种病毒来表达 GFP 样动态指示剂(GCaMP、dLight、GRAB-DA 等)和黄红色敏感视蛋白(NpHR、Chrimson、Jaws 等)位置,然后瞄准目标植入纤维套管。 然后您可以同时光学记录和刺激目标
TeleFiOpto 是我们既定的两项技术 Teleopto 和 TeleFipho 的融合。 即,光度测量数据通过2.4GHz频段发送到TeleFipho接收器,刺激定时通过红外信号发送到探头。如果您已经拥有Teleopto或TeleFipho,只需添加一些组件即可建立TeleFiOpto系统,因此比新购买完整的测光和光遗传学系统要经济得多。
* 建议使用直径 600um套管。 不推荐直径200um。
* Diameter 600um cannula is recommended. Diameter 200um is not recommended.
系统配置
示例数据
rsChRmine 激活诱发的GCaMP信号
数据由富山大学 Inokuchi 实验室的 Masanori Nomoto 博士提供。
TeleFiOpto套管 (TeleFiC-3.0-600) 被插入,瞄准在同一神经元子集中表达 GCaMP 和 rsChRmine 的小鼠的mPFC。GCaMP记录和光遗传学刺激由TeleFiOpto系统执行。 rsChRmine 是红移通道视紫红质,可引起神经元兴奋。
图 1:荧光显微镜下 GCaMP 和 rsChRmine 表达的组织观察。 我们证实 GCaMP 和 rsChRmine 在植入套管下的同一细胞亚群中均得到良好表达。该组织学是在记录会话后完成的。
图 2:整个记录会话中的原始数据。小鼠自由移动直至麻醉时间点1376秒。 在809第二时间点之前使用10uW蓝色激发光。在第809秒将激发光改为30uW,然后在第823秒在范围内调整偏移。1376秒时用0.5%氟烷轻麻醉小鼠,观察到基础荧光的抑制和自发神经元活动的抑制。 下图的时间点用彩色方块标记。