1. 适用键合相 反相色谱柱键合相包括：C18、C8、C4、C1、Phenyl、PFP、aQ 等。

2. 柱体积 色谱柱的柱体积可以通过以下公式估算： V=0.68 π (d/2)2 L·10-3 V 为色谱柱柱体积（mL），d 为色谱柱内径（mm），L 为色谱 柱长度（mm）。

3. 色谱柱柱效测试与保存 反相色谱柱出厂时都经过柱效测试，所用化合物为茶碱、邻二 甲苯、对硝基苯胺、苯甲酸甲酯和二甲苯，如有不同，以柱效 报告为准。 在条件允许情况下，请对新色谱柱进行柱效测试。 反相色谱柱出厂的保存溶剂详见柱盒或 COA 报告。

4. 温度 所有硅胶基质色谱柱使用温度应低于 60℃。

5、 样品制备 最好将样品溶解在流动相或极性相近的溶剂中。如果使用梯度 洗脱，则需要将样品溶解在初始流动相或极性相近的溶剂中。 样品溶液不应含有任何颗粒物，最好使用 0.45 μm 或更小孔径 的滤膜过滤。同时建议在删除空格色谱系统中使用在线过滤器。 样品溶液如果使用强洗脱溶剂（例如，流动相为水，样品溶剂 为甲醇），为达到较好峰形，需要降低进样量（以 250×4.6  mm 规格为例，小于 10 μL）。

6、 流动相 所有流动相，特别是含有缓冲盐的流动相，最好实验当天配制； 如果使用了早前配制的流动相，请确保流动相 pH 值是否变化， 并确保流动相没有发霉长菌。 流动相的 pH 值取决于您的应用和色谱柱填料类型。此说明书 上所列的所有的色谱柱上都建议使用 pH 范围为 2~8 之间的流 动相，如果需要使用 pH 更高（1.5-10）的流动相的硅胶柱， 请选用 Acclaim PolarAdvantage II (PA2)、Acclaim AMG C18、 Accucore Polar Premium 等色谱柱，具体使用情况请咨询工程 师或者参考该柱子的说明书。 如实验方法中使用高比例的水（>95%）作为流动相条件，强烈 建议使用耐水键合相，例如 Accucore aQ、Hypersil GOLD aQ、 Aquasil C18、Syncronis aQ 等色谱柱，保证重现性。 所有流动相都需使用 0.22 μm 滤膜过滤。