1.目的 规范U3000液相色谱仪开关机注意事项，正确使用仪器，保证检测工作顺利进行、操作人员人身 安全和设备安全

 2.适用范围 适用于U3000液相色谱仪(仪器配置:Pump+WPS+TCC+VWD/DAD+CM7.2)的使用操作。

3.职责 

3.1 U3000液相色谱仪操作人员应严格按照本规程进行仪器的开关机，对仪器进行正确地日常维护， 并填好使用记录。 

3.2 U3000液相色谱仪保管人员负责监督仪器操作是否符合规程，对仪器进行正确地开关机、定期维 护、保养。 

3.3 室主任负责仪器综合管理。

4．开关机操作程序 

4.1 开机注意事项 

4.1.1流动相的配制：根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相；根据流 动相的性质确定采用有机膜还是水相膜对流动相进行过滤；将过滤后的流动相进行超声脱气5分 钟。 

4.1.2样品的处理：称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主 成分）进行充分溶解（也可借助超声波进行超声溶解），根据检测结果再适当调节溶液的浓度; 样 品尽量过滤（有机膜或者水膜）。 

4.1.3请确认：清洗泵头密封圈的10%异丙醇或甲醇水溶液没有走空，洗针的D通道或者洗针液瓶没有 走空。

4.1.4 依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；

4.1.5双击电脑右下角“服务管理器/Chromeleon Service Manager”快捷图标,出现对话界面后点击“启动 仪器控制器/Start Instrument Controller”,等显示“本地仪器控制器运行空闲/The local Instrument  Controller is running idle ”,可以关闭界面。 

4.1.6双击在桌面上的Chromeleon 7图标（工作站主程序）。 

4.1.7在左下方点击“仪器/Instruments”，则在右边会自动显示该仪器控制面板。

4.1.8 泵排气泡/Purge：旋开泵上的排液阀(两圈以上)，设置A通道为100%，点击“冲洗/purge”，然后再出现的对话框中点击“忽略并执行/Execute despite warnings”；（默认冲洗5分钟，流速3ml/min）； 然后分别“冲洗”流路中其他通道气泡；排完气泡后记得关闭排液阀。

4.1.9设置流动相的比例及流速后，点击“马达/Motor”。此时泵自动会以设置的流速进行运行。

4.1.10清洗进样器/Prime WPS：依次执行灌注注射器/Prime Syringe、清洗缓冲环/Wash Buffer Loop、外 部清洗针/Wash Needle Externally；设置进样盘的温度（4-45℃）（仅适用于WPS带T的型号）。注 意：一定要保证注射器没有气泡，否则会影响定量；进样器托盘需要通过软件控制，一定不要手 动拨动，否则会导致针偏移或者转盘偏移；进样盘的温度与室温尽量不要相差大于20度。

4.1.11设置柱温：在控制面板“柱温箱”中，设置准备分析样品所使用的柱温箱温度；如果需要也可以 设置柱后冷却温度（大于65℃）（仅适用于RS型柱温箱）。 

4.1.12打开氘灯或者钨灯：在控制面板“UV”界面，选中“紫外灯/UV lamp”选框，或者“可见灯/VIS lamp” 选框（如果波长在可见范围），建议在系统压力稳定15min后再开灯。

4.1.12设置检测用波长，采集频率（10HZ），时间常数（0.5s）；然后点击“监视基线/Monitor Baseline”，选中“Pump pressure”和“UV_VIS”通道并点击确定/OK。

4.2 关机注意事项 

4.2.1冲洗色谱柱（如果使用了缓冲盐，首先使用10%甲醇水溶液冲洗色谱柱60分钟，然后使用纯甲醇 冲洗色谱柱60分钟, 如果柱长150mm，则分别冲洗30min即可）。

4.2.2 关闭UV面板的氘灯或钨灯。

4.2.3 关闭Column Oven面板的柱温。 

4.2.4 关闭Pump面板的泵马达/Motor。 

4.2.5 关闭工作站，停止仪器控制/Stop Instrument Controller。 

4.2.6依次关闭检测器、柱温箱、自动进样器、泵的电源。

4.2.7如果长时间不再使用仪器，建议将预柱和分析柱从仪器拆下来，将两端用死堵头密封保存。 4.2.8如果长时间不再使用仪器，建议将所有通道先使用超纯水冲洗然后再用纯甲醇冲洗保存，以防止 长菌。 

4.2.9 仪器停机后，做好相关的实验使用记录并备份和打印重要数据。

5、安全操作注意事项和日常维护要求 

5.1 安全操作注意事项 5.1.1该仪器必须有专人保管、专人使用，应有使用记录。

5.1.2 注意仪器间的洁净，保持无尘，不能和其它发热和产生气体的仪器同放一实验室。

5.1.3 使用环境：室温需控制在10～25℃之间，仪器不能直对着空调，实验应无腐蚀性气体；使用试 剂：使用的化学试剂必须为分析纯及以上，建议购买品牌产品（如Fisher等），配好的流动相最好用带0.45um水系滤膜抽滤装置过滤后，再真空脱气5分钟；实验用水：超纯水，电导率必须＜1.0μS， 建议购买超纯水机（出口有0.22um过滤装置），并按要求定期更换交换树脂。

5.1.4 严格遵守操作规程，出现故障时应作好记录，同时立即向保管人员及科室主任报告。

5.2泵的使用注意事项：

5.2.1用时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转会磨损柱塞、缸体和密封环，最终产生 漏夜。

5.2.2防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其他任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向 阀，因此应预先除去流动相中的任何固体颗粒。流动相过滤，可采用滤膜（0.2um或0.45um）等 滤过，滤膜请一定要选择正确。

5.2.3输液泵的工作压力不能超过规定的最高压力，否则会使高压密封环变形，产生漏夜。 

5.2.4流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡，影响流量的稳定性，如果有大量的气泡， 泵就无法正常工作。 

5.2.5溶剂泵长期不用时，用甲醇以1.0ml/min冲洗各个通道。

5.2.6泵头的清洗液要勤换，一般使用10%甲醇水溶液。

5.2.7每次开启泵之前要排除管道中是气泡。

5.2.8流动相由无机盐溶液转换有机溶剂前要用90%去离子水清洗管路。

5.2.9转换不同流动相时注意两者是否容易混合或者发生反应。 

5.2.10长期不用或运输前要到空清洗液瓶。

5.2.11当仪器压力波动很大时，请重新排除气泡；仍旧有波动请检查单向阀。

5.3进样器的使用注意事项：

5.3.1请一定保证注射器没有气泡（很小的也不能有），否则会影响到定量；如有请使用软件排除或者 拆下注射器排除 

5.3.2请一定不要手动拨动转盘，否则会导致针位和转盘偏移

5.3.3当仪器报错 “进样针遇到障碍物”时，应及时报修，请勿继续使用，否则会导致进样针及针座损 坏。

5.4柱温箱的使用注意事项：

5.4.1仪器使用的VIPER管路接头为金属身PEEK密封头，请安装色谱柱时注意对准，否则可能会导致 漏液或者VIPER头损坏 

5.4.2柱温箱自带气体及湿气传感器，请勿将易挥发性的溶剂敞口放置在仪器附近，否则可能会触发泄 露传感器。 

5.5检测器的使用注意事项

5.5.1长时间检测池中无流动相流动时，应关闭检测器氘灯。

5.5.2不要将物品或其他仪器档住检测器的散热孔。 

5.5.3检测器安装的位置应没有震动，温度变化不大，避免阳光直射。

5.5.4在关灯命令发出后，再次开灯须等待10分钟以上的时间；否则灯会因为过热而损坏。 

5.5.5请勿将空调的出风口或者窗户对着检测器。

5.6变色龙软件的使用注意事项 

5.6.1请勿在电脑中安装优化类软件；如果无法开启服务管理器，请恢复电脑的开机启动项。

5.6.2控制仪器的电脑请尽量不要连接互联网，防止数据丢失和数据泄露 

5.6.3定期（每月或每季度）备份软件中的数据，并拷贝到其它的电脑或光盘中保存，防止电脑故障导 致数据丢失。 

5.6.4注意请在电脑的设备管理器中，将USB口的省电管理关闭，防止通讯意外中断