四环素类抗生素（ＴＣｓ）由链霉菌产生的一类广谱抗生素，在化学结构上都属于多环并四苯羧基酰胺母核的衍生物。ＴＣｓ价格低廉，不仅作为药物广泛用于人类与动物疾病的治疗，同时也作为饲料添加剂以提高饲料利用效率，促进动物生长。然而，在动物源性食品中的普遍使用会导致其残留水平过高，引起直接毒性或过敏性反应。而且，由于具有水溶性好、体内代谢后大部分以原形排出以及在环境中不易发生生物降解等特点，造成了在水环境中的残留。

  固相萃取（ＳＰＭＥ）具有操作方便、快速、灵敏和无需大量有机溶剂的优点。然而，由于可用的商品化的萃取涂层品种较少，限制了ＳＰＭＥ的应用。分子印迹聚合物（ＭＩＰ）

  所具有的选择性和特异亲和能力，能够在复杂样品中选择性的富集模板分子；此外，ＭＩＰ耐高温高压、耐酸碱和有机溶剂，并具有一定的机械性能，因此非常适宜作为ＳＰＭＥ涂层材料。

  目前，四环素类抗生素残留检测方法有生物测定法、免疫分析法、化学发光法、毛细管电泳法、液相色谱法、液相色谱－串联质谱法等。

  采用四环素分子印迹固相微萃取涂层，并对牛奶和水样中四环素类药物进行选择性萃取，可考察涂层的制备条件，优化萃取条件，建立以土霉素为模板分子的分子印迹固相微萃取－液相色谱法同时检测四环素、盐酸土霉素和金霉素三种四环素类药物的分析方法。

  检测仪器

  液相色谱仪；高速离心机；ｐＨ计；恒温磁力搅拌器。

  液相色谱条件

  色谱柱：（２５０×４．６ｍｍ ｉ．ｄ．，５μｍ）；流速：１ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长：２７２ｎｍ；进样体积：２０μＬ；柱温：３０℃。流动相：乙腈（Ａ）－１０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（Ｂ）（ＰＢＳ，ｐＨ＝３），梯度洗脱：０～２ｍｉｎ，１５％Ａ，２～８ｍｉｎ，１５％～４０％Ａ，保持２ｍｉｎ，３ｍｉｎ之内恢复至１５％Ａ。