细胞名称:小鼠小肠隐窝上皮细胞

种属来源:小鼠

组织来源:实验动物的正常小肠组织

疾病特征:正常原代细胞

细胞形态:铺路石状细胞，不规则细胞

生长特性:贴壁生长

培 养 基:我们推荐使用EliteCell原代上皮细胞培养体系作为体外培养原代肝内胆管上皮细胞的培养基。

生长条件:气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃,

传代方法:1：2至1：6，每周2次。

冻存条件:90% *培养基+10% DMSO，液氮储存

细胞鉴定:广谱角蛋白（PCK）免疫荧光染色为阳性，经鉴定细胞纯度高于90%。

QC检 测:不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

特点和简介

小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连。小肠上皮由单层柱状上皮细胞组成，并弯曲折叠，形成下陷的隐窝和外凸的绒毛结构，而数个隐窝簇拥着一个绒毛结构，形成一个隐窝绒毛单位。体外培养小肠隐窝上皮细胞为研究小肠黏膜修复机制和维持小肠黏膜完整性等方面提供了前提和基础。
小鼠小肠隐窝上皮细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 收到细胞后次传代推荐将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。

细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

说明：
没有约定送货日期、时间段，我细胞库将根据细胞状态自主安排快递时间，本中心的细胞仅供科学研究之用，严禁转让或用于生产。采用此订购单订购细胞，白益生物认为购买者已认可白益的规定并遵守此协议。必要时，本司有权采取相应行动。
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