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¥1200产品名称:γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒
品牌:白益
货号:BY-C-A207
规格:50管/48样
检测方法:可见分光光度法
本品仅用于科研实验,不用于临床。
γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒样本制备:
血清(血浆)样本的制备
血清和血浆均是不含细胞(包括血小板)等有形成分的血液液体部分,其主要区别是血清不含凝血因子和血小板,血浆则含有凝血因子,它们的制备方法如下:
1) 血清的制备:获得的血液不能抗凝,盛于离心管或可以离心的器皿中,静置或置于37℃环境中促其凝固,待血液凝固后,将其平衡并离心(一般为1000-2000g,离心 5~10 min),得到的上清液即为血清,可小心将上清吸出(注意切勿吸出细胞成分),分装备用。
2) 血浆的制备:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝剂(抗凝剂:血液 = 1:9,将血液加到一定量后颠倒混匀,离心(离心条件同上)后所得的上清液即为血浆。初用者将上清移至另一清洁容器,吸出血浆时用毛细吸管贴着液面逐渐往下吸,切忌不能吸起细胞成分。
组织或细胞匀浆样本的制备
收集组织或细胞样本,加入匀浆介质后进行匀浆,有4种匀浆方式可以选择。
1) 手工匀浆:将样本(含匀浆介质)倒入玻璃匀浆管中,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的容器中,右手将捣杆垂直插入匀浆管中,上下转动研磨数十次(6-8 min),使组织匀浆化。
2) 机械匀浆:将已称重的组织装入EP管,加入匀浆介质,用组织匀浆机,在冰水浴条件下,60 Hz,90s研磨制成组织匀浆,皮肤、肌肉组织及植物组织等可适当延长匀浆时间。
3) 超声破碎:用超声波发生器以振幅14 μm超声处理30s,在冰水浴条件下,破碎细胞;或者用超声波破碎仪,200 W,2s/次,间隙3s进行处理,总时间5min。
4) 反复冻融:适用于细胞样本,即用低渗液或双蒸水重悬细胞,再将细胞悬液进行“冷冻-融化-冷冻”循环,重复3次左右。
值得注意的是,此方法使的某些酶的活力受影响。因此,检测细胞样本的酶活力时不推荐使用此方法。
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