APOE老年痴呆检测介绍：

人 APOE 基因相关位点 rs429358 和 rs7412 分型检测试剂盒（熔解曲线法）

【货号规格】HRAP-20；20 人份/盒

【试剂效期】6 个月

【储存条件】试剂应于-20℃冻存，反复冻融次数低于 3 次

【自备仪器】SLAN96 或其他四色荧光定量 PCR 仪、离心机

【样本要求】 人口腔黏膜、全血或新鲜组织抽提得到的 DNA 样本。样本浓度 10-20ng/μl。样本经琼脂糖凝胶电泳检测， 须条带单一无降解或者拖带

【试剂组分】 APOE老年痴呆检测组分 规格 反应液 1 96μl*1 管 反应液 2 20μl*1 管 dNTP 64μl*1 管 检测液 96μl*1 管 酶 8μl*1 管 双蒸水 600μl*1 管

【操作流程】 1、试剂配制：本试剂内含检测液，通过单管上机反应对 2 个位点进行分型检测。将试剂从冰箱取出后，室 温融化，充分颠倒混匀并瞬时离心，按照下表配制反应体系，瞬时离心后上机检测。 组分 反应液 1 反应液 2 检测液 dNTP 双蒸水 酶 待测样本 加量 2μl 0.8 2.4μl 1.6μl 9μl 0.2μl 4μl 2、上机条件（检测通道为 FAM、ROX） 扩增部分（此步骤不需要收集荧光） 95℃ 5min 95℃ 20s 60℃ 30s 72℃ 30s 72℃ 5min 熔解曲线部分 95℃ 60s 45℃ 3min 45℃-70℃ 熔解曲线扫描 【结果判读】试剂盒标配无阳性对照，因此建议每次上机做 10 个以上的样本，以方便判读结果。三个位点 的基因型判读如下所示。 50 cycles位点 荧光通道 熔解峰峰型 基因型 rs429358 FAM 64℃单峰 TT 69℃单峰 CC 64℃及 69℃双峰 TC rs7412 ROX 61℃单峰 TT 66℃单峰 CC 61℃及 66℃双峰 TC 注：阴性对照应无熔解峰

【生产厂家】 企业名称：上海翼和应用生物技术有限公司