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台盼蓝溶液0.4%
产品货号:C0040
储存条件:4℃,12个月
产品性质
别名:锥蓝或锥虫蓝
分子式:C34H24N6Na4O14S4
分子量:960.81
CAS:72-57-1
产品描述
台盼蓝是一种阴离子型染料。Trypan blue不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,即产生所谓的拒染现象,而死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色,是常用的检测细胞活率的方法。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中常用的死细胞鉴定染色方法之一。
Trypan blue stain(0.4%)常用于检测细胞膜的完整性以及细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量,0.4%为常用的浓度。
自备材料:PBS 细胞ji数板 显微镜
参考步骤
1、收集细胞:
如为贴壁细胞,应用yi蛋白酶- EDTA溶液消化细胞,收集细胞。
如果收集悬浮细胞,则可以直接收集细胞。收集好的细胞在1000~ 2000g离心1min , 弃上清,用1mIPBS重新悬浮细胞沉淀。
2、台盼蓝染色:
吸取100μl细胞悬液到1.5ml或0.5ml离心管内,加入100μl Trypan blue stain(0.4%)轻轻混匀,静置染色3min(染色时间可适当延长,但不宜超过10min)。
3、细胞计数:
吸取经过染色后的细胞,用血细胞ji数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少需要数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率计算公式如下:
细胞存活率= (细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数x 100%
注意事项
1、Trypan blue stain对人体有轻微毒性,请注意小心防护。
2、注意凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。