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一、质谱流式系统的原理分析:
(1)质谱流式技术(MassCytometry)结合了传统流式技术高效的单细胞研究能力和飞行时间质谱的全谱高分辨率优势,采用金属标记抗体与待测抗原结合,理论上可提供140个检测通道,并且克服了传统流式荧光发射基团光谱重叠的问题,实现了单细胞水平的高通量分析。
(2)质谱流式技术采用金属标记的抗体识别细胞表面或胞内的抗原,标记后的细胞经雾化后进入电感耦合等离子体矩管中进行离子化,离子云随后被传输至飞行时间质量分析器中,检测器依次记录各种金属离子到达的时间,检测出细胞中各种标签金属的含量,最终形成不同的金属离子信号峰。检测产生的高维数据通过分类、聚类和降维算法进行处理,结果可以反映基于靶蛋白丰度的各种细胞群体的表型和功能。
二、质谱流式系统的技术特点:
上百种独立检测通道,质谱流式仪中的电感耦合等离子体-飞行时间质谱(ICP-TOF)具有完整的元素检测范围(70-209amu),可以同时对单个细胞的数十个参数进行检测。
2.金属元素标签,多个相同的金属离子鳌合在标签上,与抗体分子共价结合,增强抗体分子在ICP-TOF中的信号强度。
3.金属编码(Barcoding)技术,基于金属编码技术,支持10种以上样本的同时检测,大幅度提高样品检测通量。下图所示,使用五种Pd元素对5份样本进行标记,每份样本占比约20%;质谱流式配合金属编码技术可以高通量地进行样本检测,并且保持数据的完整性。
4.超快速TOF-MS,全新设计的离子光学系统,具有灵敏度和分辨率。
5.高维数据可视化分析软件,visCAT(visualCytometryAnalysisToolkit)是一款宸安生物自主研发的可视化工具包,提供了多种数据预处理、聚类、降维可视化的方法,以及多种变量关系的热图。图像处理单元(GraphProcessingUnit,GPU)的使用大幅提升了各类算法的计算速度,科研人员可以自由组合不同的算法对高通量数据进行多维度分析研究。
三、质谱流式应用:
1.肿瘤免疫:单细胞水平动态分析肿瘤和免疫系统异质性,支持肿瘤免.疫治.疗个体化诊断。
2.感染免疫:揭示天然病原体作用下,各种免疫细胞复杂的表型和功能,评价疫苗的保护效应。
3.自身免疫:绘制自身免疫性疾病相关的免疫细胞图谱,发现关键免疫细胞亚群,解析发病机制。
4.神经炎症:绘制神经-免疫系统相互作用图谱,深度解析神经系统免疫调节网络。
5.免疫年龄:深度记录免疫系统随年龄增长的变化,评估个体的免疫状态,分析免疫衰老特征。
6.T细胞抗原:分析鉴定肿瘤新生抗原,检测T细胞激活水平,助力新型药物开发。质谱流式——高通量单细胞技术。
四、斑马鱼(北京)科技有限公司,负责产品的推广销售和技术支持,为您提供仪器的参数、价格、选型、技术原理等信息,更多信息可以和我们联系。