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Reverse Transcriptase | Reverse Transcriptase | MedChemExpress (MCE)

时间：2024-10-08 阅读：24

Reverse Transcriptase

MCE 国际站：Reverse Transcriptase

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件： -20°C，1 年

简介：Reverse Transcriptase是通过基因重组技术克隆表达M-MuLV的缺失突变型RNase H-的反转录酶。

概述：Reverse Transcriptase是通过基因重组技术克隆表达M-MuLV的缺失突变型RNase H-的反转录酶。一般的野生型M-MuLV(Moloney Murine Leukemia Virus)具有以下几种活性：1)依赖于RNA的DNA聚合酶活性；2)依赖于DNA的DNA聚合酶活性；3)RNase H活性。由于RNase H能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶的RNase H活性缺失，延伸能力强，可用于较长的cDNA合成，高比例的全长cDNA文库的构建以及Real Time RT-PCR反应等。

描述：

该酶缺乏RNase H活性，延伸能力强，可用于较长cDNA合成、高比例全长cDNA文库构建、Real Time RT-PCR反应等。

操作说明：cDNA第一链合成反应体系1) 试剂融化后，将试剂盒中各组分混匀并稍微离心后置于冰上。2) 按顺序加入以下反应物：3) 如果RNA模板GC含量高或者含有二级结构，可先将RNA模板和Water(RNase-Free)混匀后，65℃孵育5min，冰上冷却，再加入其它组分。4) 3) 轻轻混匀，离心。42℃孵育15-30min。如果RNA模板中不含poly A结构，25℃先孵育5min，随后42℃孵育15-30min。反应产物可直接用于PCR，如果不立即使用，-20℃保存少于一周，长时间保存建议-70℃放置。注意：有实验结果提示，本反转录酶可在15min内完成1kb反转录反应。

注意事项：1. 用DEPC处理实验用到的所有实验器材，或者购买已经证明无核酸酶的实验用具，实验过程戴手套并经常更换手套，避免RNA酶的污染。2. 确保所用试剂及超纯水中无RNA酶污染。3. 纯化过的RNA必须保证不含有盐，金属离子，乙醇和苯酚，以上成分会干扰第链cDNA的合成反应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。4. 为保证反转录反应的有效进行，需使用高质量的RNA模板。5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴次性手套操作。