T7 Endonuclease I | T7 Endonuclease I | MedChemExpress (MCE)
时间:2024-10-08 阅读:33
T7 Endonuclease I
MCE 国际站:T7 Endonuclease I
品牌:MedChemExpress (MCE)
存储条件: -20°C,1 年
简介:T7 Endonuclease I可识别并切割不完配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA或者以更慢的速度切割含切刻的双链DNA。
概述:T7 Endonuclease I识别并切割不完配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA或者以更慢的速度切割含切刻的双链DNA。该酶切割错配碱基5’端的第一、第二、或第三个磷酸二酯键。
描述:
T7 核酸内切酶 I 可识别并切割不完配对的 DNA、十字形结构 DNA、霍利迪结构或交叉 DNA、异源双链 DNA,或以较慢的速度切割缺口双链 DNA。该酶可切割错配碱基 5' 端的第一个、第二个或第三个磷酸二酯键。
操作说明:1) 分别以突变体DNA和野生型DNA为模板,PCR扩增含突变位点的片段,片段长度约500bp, 突变位点避免位于片段中间,便于区分切割后条带;2) 变性退火PCR产物3) 酶切反应:上 步反应液中加入0.5 μL T7 E1酶,37℃保温15-30min,立即加入DNA loading buffer终止反应,混匀后65℃保温10min,琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果。
注意事项:1. 用T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。避免反应温度超过55℃,会导致酶活性降低。2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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