Cell Counting Kit-8 的工作原理与应用领域说明
时间：2024-11-07 阅读：57
一、工作原理
Cell Counting Kit-8的工作原理基于颜色变化。WST-8是一种类似于MTT（四唑盐）的水溶性化合物，但其毒性更低，更适合用于细胞活性检测。在细胞存活状态下，细胞内的脱氢酶可以将WST-8还原为橙黄色的甲臜产物（Formazan）。甲臜产物的生成量与活细胞的数量成正比，因此可以通过测定甲臜产物的吸光度来评估细胞的存活情况和增殖能力。
具体步骤如下：
细胞接种
将待测细胞接种到96孔板中，每孔加入一定数量的细胞。
加入Cell Counting Kit-8试剂
在细胞培养一定时间后，向每孔中加入适量的试剂。可以直接加入到细胞培养基中，无需去除原有的培养基。
测量吸光度
使用酶标仪测定每孔中甲臜产物的吸光度。吸光度的大小与活细胞的数量成正比，从而可以计算出细胞的存活率和增殖能力。
二、应用领域
细胞增殖检测
广泛用于检测细胞的增殖能力，适用于各种类型的细胞，包括肿瘤细胞、原代细胞和干细胞等。
细胞毒性检测
可以用于评估药物、化学物质和其他因素对细胞的毒性作用。通过比较处理组和对照组的吸光度，可以计算出细胞的存活率和毒性指数。
药物筛选
在高通量药物筛选中具有重要应用，可以快速评估大量化合物对细胞的影响，帮助研究人员筛选出具有潜在治疗价值的候选药物。
疾病研究
可用于研究疾病的发生机制和进展，例如肿瘤的生长和转移、神经退行性疾病等。