蛋白电泳:如何跑出漂亮的条带 二
时间:2015-07-06 阅读:980
之前我们就电泳过程中出现的涂抹痕迹展开了解释,今天主要讨论 SDS-PAGE 实验中出现条纹拖尾的原因进行分析。可点击阅读原文查看前天推送的内容。
这个不是非常严重,有条纹拖尾的泳道(图中左边第 5 道)也是可以用的。条纹的出现是由于一部分膜组分中的高浓度蛋白在跑积层胶过程中析出然后在很短的时间里又回到溶液中。由于分离胶表面存在轻度的缺陷(可能是在倒积层胶之前分离胶干了一些),造成整个泳道的蛋白浓度的不一致,使得出现这种条纹拖尾症状,而不是一致的很深的背景。
第 4 道也是由于上述原因而出现条纹拖尾。电场受到了第4道非均一浓度的影响而出现了条带的缩窄。注意凝胶前端染料的缺失,是由于电泳时间过长所致。
这块胶就非常难看了。原因在于分离胶倒完之后没有用水或者异丙醇压胶,导致分离叫上缘非常粗燥,就像你看到的一样。当样品堆积在凹凸不平的分界线时,位于凹陷部位的蛋白由于不能适当的浓缩就析出来了。然后再跑胶过程中逐渐溶解造成了条纹拖尾症状。