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DNA Marker试剂 是分子量不同的DNA片段,主要用途就是DNA 分子凝胶电泳时,加样用做对比来检测琼脂糖凝胶是否有问题。通过其大小可以粗略估算样品DNA分子量的大小。
作为一种分子标记(Marker),构建分子图谱。分子标记克隆在质粒上,可以繁殖及保存。
DNA Marker 是分子量不同的DNA片段,主要用途就是DNA 分子凝胶电泳时,加样用做对比来检测琼脂糖凝胶是否有问题。通过其大小可以粗略估算样品DNA分子量的大小。
现在常用的DNA MARKER有两种,一种是病毒等DNA经过酶切获得的,分子量大小有零有整,另外一种是固定数值的,比如100bp,200bp等。
两种Marker都不难制作,对于*种,稍微难一些,主要是要获得病毒等大的基因组片段,然后用适当的酶切,切割*以后,就能得到相应的图谱。第二种实际上很简单,如果你手头有任何一个载体,而且它的序列*清楚,那么可以采用PCR的方法获得一系列大小不同的片段,比如上游引物可以使用一个,然后用数数的方法确定下游100bp处的下游引物,扩增出的就是100bp的片段,200bp处的引物就是200bp的片段,依此类推,可以获得一系列不同大小的片段,扩增后,把它们放到一起,就获得了自制的Marker了。
电泳条件: 1.5%琼脂糖,上样量5 uL,胶孔宽度为6 mm,电泳缓冲液1×TAE,8 V/cm。