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表面等离子体共振互作仪(SPR)具有实时、免标记、高灵敏度等优点,SPR技术被广泛应用于生物分子相互作用的研究。在SPR能够检测的分子量范围内,基本所有的具有特异性反应的生物分子都可以被SPR生物传感器检测。尤其在蛋白组学、食品毒物检测、环境监测分析、快速药物筛选等方面具有广泛应用。
表面等离子体共振互作仪区别于一般的蛋白质等分子间相互作用的传统方法,等离子体共振仪可进行实时检测,无需样品标记,样品用量少,节约耗材消耗,并且应用范围广,不受样品限制,可进行包括核酸、蛋白质、抗体、纳米颗粒等各类分子的相互作用和动力学常数的定量和定性分析。
BI-4500具有多通道筛选和BI-DirectFlowTM(BI-直流技术),在国内外众多科研单位用于生物及医学研究,涉及的研究领域包括肿瘤研究、药物研发、细胞生物学、分子生物学、蛋白组学等。
一、仪器主要参数
1.工作站
1.1光源:670nm
1.2检测速度:4ms
1.3入射角:40-47Deg(气相);67-81Deg(液相)
1.4检测灵敏度:<0.06RURMS
1.5漂移指数0.30RU/h周围环境漂移<1oC/h
1.6温度范围6oC-50oC(降温限止在低于室温10oC)
1.7电源110-230V50/60Hz
2.流体操作
2.1样品流动通道:采用双直流技术通过自动进样器对5通道精确进样(包括系列流动模式),并带有差分检测技术可实现高灵敏的快速检测。
2.2流动池材料:PEEK(生物相容)
2.3流速:1.0-250μL/min
2.4注射体积:50μLto10mL
2.5溶液传输方法:双流注射泵程控5通道进样提供均一和连续的液流;宽大的流速范围;精确和平稳的液流使基线恒定并便于研究人员获取高质量的数据;低噪音,易操作
2.6样品注射方法:自动进样功能,样品可存放在两个架盘各有12到384孔板;双直流技术;单通道及串联流动模式;零死体积注射阀;HPLC型部件
2.7通道体积:<1μL
2.8注射最短时间:<0.2s
2.9动力学常数:ka<1x108m-1s-1,kd>1x10-6s-1
2.10亲和常数:KD=10-3M(1mM)到10-12M(1pM)
2.11最小可分析的分子量:100Da
2.12分析模块:直流模块。用户可根据自己的需求,自己设计修饰常用芯片,芯片也可重生使用。
2.13配有自动泵,能够切换六瓶缓冲液,并可以连续进液和在线脱气。
3.控制系统:
3.1预装软件包的计算机;Windows10操作系统;USB3.0计算机接口。
3.2精密的控温技术可进一步提高检测系统的灵敏度和稳定性。
3.3观察SPR吸收峰谱线可直接评估芯片的质量。
3.4宽阔的测量范围;背景和参比的准确扣除。
4.软件功能:
4.1提供包括动力学分析的软件包
4.2实时收集SPR数据并同时分析处理数据
4.3程序控制检测过程;并可即时修改重复贮存调用。
4.4快速样品、重复进样和多通道渐序进样
4.5数据处理和叠加功能
4.6智能向导协助用户使用仪器
4.7智能系统校校正
4.8提供评估键合作用的分析工具(例如亲和力和动力学、浓度以及表面吸附量的测定)
4.9提供弥补本体折射率变化、非特异性吸附、传质控制过程、噪音等形成的干扰功能
二、仪器主要功能
①动力学定量分析(Ka,Kd,KD)
②生物标记检测,药物靶向研发
③食品检测,环保监测
④小分子免标分析(<100Da)
⑤材料表面薄膜厚度和结构变化
⑥电化学同步分析
⑦气体分子、糖分子、DNA、抗体、肽段、蛋白、病毒、细菌、癌细胞分析
三、仪器主要特点
①5个通道高通量全自动取样
②高灵敏度小分子检测
③无需标记
④BI-直流技术精确进样
⑤实时监测
⑥定量评估
⑦芯片可再生
四、仪器主要应用
1.生物科学
①DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质、蛋白质-药物的相互作用
②基因鉴定:如DNA-DNA的相互作用
通过在传感器表面涂覆DNA探针,可用于亲和力结合研究、靶DNA浓度检测、DNA/基因突变研究、DNA杂交检测研究等。BI-DirectFlow™系统可确保以接近零的色散进行精确的样品输送,从而可以比以往更高质量的快速动力学和高亲和力结合过程进行研究
③免疫传感:抗体-抗原、配体-受体相互作用
④蛋白质的构象变化
蛋白质和其他生物分子的构象变化通常很小且非常快,因此难以测量和监测。而SPR技术能够检测表面结合分子中的这些小构象变化,这将提供有关蛋白质在许多生物功能和过程中的关键作用的重要信息。
2.电化学
①电聚合、电沉积、电腐蚀
②免疫传感
③固定化氧化还原分子的构象变化
3.食品安全检测
①痕量金属分析(例如饮用水中的Pb2+)
由于生活和工业废物、药物和杀虫剂的使用等原因,各种各样的有毒化学物质被释放到环境中。不幸的是,这些化学物质经常被纳入我们的日常生活,并可能构成重大的健康危害。SPR生物传感器已被证明具有环境应用的潜力,最近的研究已被报道可以检测痕量的重金属和其他环境污染物。在BI,我们的SPR仪器可以帮助您监控这些因素,以提高饮用水的安全性等。
②正在开发分析营养成分和筛选有害残留物(例如降解食品中的胺)
SPR系统,用于检测食品相关领域的各种分析物,以评估消费者级食品是否具有适当的质量和安全水平,可以分发给公众。BI的SPR仪器可以帮助您分析营养成分并筛选食品中的残留物,以确定各种食品的卫生条件和纯度。
4.气体分析
①固气界面研究
与当前许多其他SPR仪器不同,BI高精度的SPR仪器具有气相检测功能。它们为小分子检测提供可靠的结果,并有助于表征固气界面上的聚合物和薄膜。通过在金属膜上涂覆聚合物等传感材料,可以通过观察SPR角移来检测分子在传感材料上的吸附。此功能能够研究气相改性表面上的各种分子结合过程。
②有毒分子检测
由于BI的SPR仪器对固气界面处发生的过程很敏感,因此它们可以检测与各种单层分子受体的蒸汽相互作用。这为化学蒸汽传感和气相传感器的开发铺平了道路,并对环境安全和化学战剂的检测都有影响。
③医学研究
通过创建检测器来分析蒸气中的化学成分,例如人类呼吸。使用这些SPR方法可能对各种与健康相关的研究和整体医学研究具有巨大的意义。