全自动磁珠提取仪KingFisher技术的工作原理：样品、溶液和磁珠置于微孔板或管中，磁棒表面套有专门的磁套用于保护磁棒，避免其与样品/溶液/磁珠直接接触。磁棒的工作模式可以分为以下四种（以样品管为例）：

1、收集磁珠：在磁珠收集过程中，磁棒插入磁套，与磁套一起在样品管中上下移动，混匀的磁珠被磁棒吸附在磁套的下沿。完成收集的磁棒与磁套一起升起，等待转移至下一个位置。

2、释放磁珠：当完成磁珠的收集后，磁棒与磁套一起转移到下一个的样品管位置，准备释放磁珠。在释放过程中，磁棒保持静止（高位），而磁套下降进入样品管（低位），这使得磁套下沿的被吸附的磁珠脱离磁棒的吸引，释放进入样品管。磁套继续在溶液中上下运动，使磁珠在溶液中充分混合。

3、清洗磁珠：磁珠清洗是磁珠提取纯化中最为关键的一步。通过清洗，可以将那些与磁珠非特异性结合的杂质洗去，从而提高产物的纯度。在清洗时，磁套下降进入溶液，而磁棒停留在上方，通过磁套的上下运动，使得磁珠在溶液中充分混合。为了地实现清洗效果，可以选择不同的混合速度用于优化实验结果，如Bindlt软件支持5种不同的混合模式，而且不同速度之间可以进行任意组合。此外，经优化设计的磁套，确保在磁头转移时没有任何挂液现象。

4、磁珠洗脱：经过清洗缓冲液处理的磁珠，通过磁棒转移至盛有洗脱液的样品管位置，进行洗脱，其过程与释放磁珠类似。在洗脱过程中可以选择进行动能洗脱或孵育。动能洗脱是指通过磁套的上下运动，将磁珠与洗脱液充分混合接触，配合孵育加速样品从磁珠上释放的过程。在洗脱时，通常采用小体积洗脱，如初始样品200μl，洗脱液50μl，这样通过洗脱，就可将样品浓缩4倍，从而提高产物的浓度。

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