小鼠血清（无菌过滤）

血清使用注意事项：

防止发病免疫血清多用马、牛血液制备，马、牛血清对其它动物来说，也具有抗原性，有引起血清病的可能，因此，使用免疫血清要注意防止引起血清病，预防的主要措施是使用提纯的制品，不用不合格的产品；另外，不要有急功近利的想法，要按照要求剂量使用，一次用量不可过大。

大鼠小鼠取血操作步骤：

1.剪尾采血  

小鼠每次采血量0.1ml，大鼠每次采血量0.3-0.5ml

左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤，将鼠头朝下，鼠保定后将其尾巴置于50℃热水中浸泡数分钟，使尾部血管充盈。擦干尾部，再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm，用试管接流出的血液，同时自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球压榨止血并用6%液体火棉胶涂在伤口处止血。

2.去除眼球采血

小鼠采血量0.5-1ml

左手捉住小鼠颈部皮肤，轻压在实验台上，取侧卧位，左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压，使眼球杰出。用眼科弯镊迅速夹去眼球，将鼠倒立，

用器皿接住流出的血液。采血完毕立即用纱布压榨止血。大鼠少用。

3.心脏采血

小鼠采血量0.5-0.6ml，大鼠采血量1-1.5ml

鼠仰卧位固定，剪去胸前区被毛，皮肤消毒后，用左手食指在左侧第3-4肋间触摸到心搏处，右手持带有4-5号针头的注射器，选择心搏zui强处穿刺，当刺中心脏时，血液会主动进入注射器。

4.断头采血

小鼠采血0.8-1.2ml，大鼠采血量5-10ml

左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤，将鼠头朝下，右手用剪刀剪断鼠颈部约1/2-4/5，让血液流入试管。

5.眼眶静脉丛采血

小鼠采血量为0.2-0.4ml，大鼠采血量为0.4-0.8ml

取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管，临用前折断成1～1.5cm长的毛细管段，浸入1％肝素溶液中，干燥后用。取血时左手捉住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部，悄悄向下压榨颈部两边，引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血，右手持毛细管由内眦部刺进结膜，再悄悄向眼底部方向推进，悄悄旋转毛细管以划破静脉丛，让血液顺毛细管流出，接收入事前准备的容器中。采血后纱布轻压眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采纳此法取血。刺入深度小鼠为2-3mm，可采血0.2-0.3ml；大鼠为4-5mm，可采血0.4-0.8ml。

Tips：

1. 血清的保存：在-15℃以下血清的有效期为5年，4℃可保存数周，不宜室温保存，不宜反复冻融。配制成培养基后应在四周内用完，一瓶血清如无法一次用完应无菌分装成恰当数量并冷冻保存。

2、血清中的絮状沉淀物：血清是多种蛋白质的混合物，在冻融过程中会出现絮状沉淀物，主要原因是由于血清中脂蛋白和纤维蛋白变性所造成。但并不影响血清本身的质量和使用。如需去除可先400g离心取上清液配制成培养基再过滤即可使用。

3、血清的解冻：合理的解冻方式可以更好的保护血清质量并可以在上减少絮状沉淀物的产生。血清从低温冰箱中取出后，经4℃冰箱、室温、37℃水浴逐步规则摇晃均匀融解，直至融解后再使用。

4、血清的热灭活：将血清严格56℃水浴均匀加温30分钟可以灭活血清中的补体系统。是不是所有用途的血清都需要热灭活呢？对大多数细胞来说是不需要的。激活的补体能参与溶解细胞，刺激光滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。因此在免疫学研究，培养ES细胞，昆虫细胞和平滑肌肉细胞时，建议使用热灭活血清，在正常情况下加热处理对血清的促细胞生长效应无明显促进作用，甚至会因为加热处理影响血清的质量。

5、血清中的“小黑点”现象：血清在经过一段时间的低温冻存再融解后，在正常情况下会出现絮状蛋白沉淀。但往往有用户反应血清中有“小黑点”现象，认为是微生物污染。实验发现血清在37℃环境放置时间过长或经过加热灭活处理，血清中的沉淀物往往会呈增多趋势，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，让使用者误以为是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如无必要，可以不进行热灭活处理并保证血清的低温保存。

小鼠血清（无菌过滤）

实验证明使用血清时注意以下几点事项不但可以保证血清质量并能给使用者带来方便：

◎血清可在-15℃以下低温保存。

◎血清一瓶血清一次无法用完的应分装冻存，分次用完。

◎血清按-15℃以下至4℃至室温至37℃逐步均匀解冻使用。

◎若非必要，无须进行热灭活。若必须做血清热灭活的，须严格控制在56℃水浴30分钟均匀加热灭活。

血清的定义

血清指血浆除去纤维蛋白原后的胶状液体。每100ml人血清含有蛋白质6-8g，其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不会凝固。有免疫，维持酸碱平衡和渗透压的作用，血清蛋白质亦可储备供给机体蛋白质不足时的应用。人和动物的血清常用以进行各种血清学试验，帮助诊断疾病。含抗体的血清可作为预防或治疗疾病之用

血清的主要成分

血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成，这些化学成分包括白蛋白，α1、α2、β、γ-球蛋白，甘油三酯，总，谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，但仍存在一些问题。主要是：

第一：血清的成份可能有几百种之多，对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚，尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识，这给研究工作带来许多困难；

第二：血清都是批量生产，各批量之间差异很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保证每批血清的相似性极为困难，从而使实验的标准化和连续性受到限制；

第三：不能排除血清中含有易变物质，这被认为是“瓶中恶化”的原因之一