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面议Roche罗氏 6924204001 FastStart Essential DNA 绿色大师
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Roche罗氏 DNA 绿色大师-常备现货
罗氏Roche总部位于瑞士巴塞尔,是全球在医药和诊断领域,致力于研究并处于 ling xian 地位之一的保健集团。罗氏的诊断部门提供了独yi无er的产品品种,为全shi界的研究人员、医师、病人、医院和实验室提供多样化的创新测试产品及服务。罗氏诊断在全球有近19,000人员正致力于科研、发展、产品的市场运作和服务以及一体化的解决方案。
Roche罗氏 6924204001 FastStart Essential DNA 绿色大师 10 x 500次反应 每次 20μL,产品简介:
产品品牌:Roche罗氏
产品货号:6924204001
产品名称:FastStart Essential DNA 绿色大师
产品规格:10 x 500次反应
Roche罗氏 DNA 绿色大师-常备现货
Roche罗氏 6924204001 FastStart Essential DNA 绿色大师 10 x 500次反应 每次 20μL,产品说明:
概述
FastStart Essential DNA Green Master 是一种即用型反应混合物,在 LightCycler Nano 和 LightCycler®® 96 仪器上使用 SYBR Green I 检测格式。它用于 8 管条或单管中的热启动 PCR。热启动PCR通过在反应开始时最大限度地减少非特异性扩增产物的形成,显著提高了PCR的特异性和灵敏度。
应用
FastStart Essential DNA Green Master 提供试剂,包括 SYBR Green I 染料,用于使用 LightCycler 96 仪器和 LightCycler®® Nano 仪器扩增和检测 DNA。该试剂盒非常适合用于基因检测和定量的热启动PCR检测。
原则
PCR产物的产生可以通过测量SYBR绿I荧光信号来检测。SYBR Green I染料插入DNA螺旋(Zipper,H.等人,2004)。在溶液中,未结合的染料表现出很少的荧光;然而,荧光(波长,530 nm)在DNA结合时大大增强。因此,在PCR过程中,SYBR Green I荧光的增加与产生的双链DNA量成正比。由于 SYBR Green I 染料非常稳定(在 30 个扩增循环中只有 6% 的活性损失),并且 LightCycler® 96 仪器的光学元件与激发和发射波长相匹配,因此它是测量总 DNA 时的首xuan试剂。
在光循环仪® 96系统上进行实时荧光定量PCR期间,SYBR Green I进行DNA检测的基本步骤是:
1. 在扩增开始时,反应混合物包含变性DNA、引物和染料。未结合的染料分子发出微弱的荧光,产生最小的背景荧光信号,在计算机分析过程中会减去该信号。
2. 引物退火后,一些染料分子可以与双链结合。DNA结合导致SYBR Green I分子在激发时的光发射急剧增加。
3. 在伸长过程中,越来越多的染料分子与新合成的DNA结合。如果连续监测反应,则可以实时观察荧光的增加。在下一个加热循环的DNA变性后,染料分子被释放并且荧光信号下降。
4. 在每个PCR循环的伸长步骤结束时进行荧光测量,以监测扩增DNA量的增加。
为了证明只有您想要的PCR产物被扩增,您可以在PCR后进行熔解曲线分析。在熔解曲线分析中,反应混合物缓慢加热至95°C,这导致双链DNA熔解并相应降低SYBR Green I荧光。仪器持续监测这种荧光降低,并将其显示为熔解峰。每个熔解峰代表特定DNA产物的特征解链温度(Tm)(其中DNA为50%双链和50%单链)。决定dsDNA的Tm的最重要因素是该片段的长度和GC含量。如果PCR仅产生一个扩增子,则熔解曲线分析将仅显示一个熔解峰。如果存在引物二聚体或其他非特异性产物,它们将显示为额外的熔峰。因此,检查PCR产物的Tm可以与在凝胶电泳中按长度分析PCR产物进行比较。
本产品的工作原理
FastStart Essential DNA Green Master 是一种即用型反应混合物,专为在 LightCycler 480 多孔板 96 或 LightCycler®® 96 仪器上的 LightCycler® 8 管条(白色)中应用 SYBR Green I 检测形式而设计。它用于执行热启动PCR。热启动PCR已被证明通过在反应开始时最小化非特异性扩增产物的形成,显着提高PCR的特异性和灵敏度(Chou,Q.等人,1992,Kellogg,D.E.等人,1994,Birch,D.E.,1996)。FastStart Taq DNA 聚合酶是一种化学修饰形式的热稳定重组 Taq DNA 聚合酶,在高达 75°C 的温度下没有活性。 该酶仅在高温下具有活性,其中引物不再非特异性结合。在循环开始之前,酶在单个预孵育步骤(95°C,5至10分钟)中wan全激活(通过去除封闭基团)。激活不需要其他热启动技术典型的额外处理步骤。
其他说明
仅用于生命科学研究。不适用于诊断程序。
产品订购信息:
6924204001 FastStart Essential DNA 绿色大师 10 x 500次反应 每次 20μL