Roche罗氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster（Roche）

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罗氏Roche总部位于瑞士巴塞尔，是全球在医药和诊断领域，致力于研究并处于领xian地位之一的保健集团。罗氏的诊断部门提供了du一无二的产品品种，为quan世界的研究人员、医师、病人、医院和实验室提供多样化的创新测试产品及服务。罗氏诊断在全球有近19,000人员正致力于科研、发展、产品的市场运作和服务以及一体化的解决方案。

 Roche Fast Start Essential DNA Green Master

Roche罗氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster（Roche）  5×100反应(20μl)，产品简介：

产品品牌：Roche罗氏

产品货号：064027 12001

产品名称：FastStartEssentialDNAGreenMaster（Roche）

产品规格：5×100反应(20μl)

Roche罗氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster（Roche）  5×100反应(20μl)，产品说明：

FastStart Essential DNA Green Master是一种现成的反应混合物，使用LightCycler®Nano和LightCycleer®96仪器上的SYBR Green I检测格式。用于8管条或单管中的热启动PCR。热启动PCR通过*小化反应开始时非特异性扩增产物的形成，显zhu提高了PCR的特异性和min感性。

应用

FastStart Essential DNA Green Master提供试剂，包括SYBR Green I染料，用于使用LightCycler®96仪器和LightCycleer®Nano仪器扩增和检测DNA。该试剂盒非常适合用于基因检测和定量的热启动PCR分析。

PCR产物的产生可以通过SYBR Green I荧光信号的测量来检测。SYBR Green I染料插入DNA螺旋（Zipper，H.等人，2004）。在溶液中，未结合的染料显示很少的荧光；然而，荧光（波长，530nm）在DNA结合时大大增强。因此，在PCR期间，SYBR Green I荧光的增加与产生的双链DNA的量成正比。由于SYBR Green I染料非常稳定（在30个扩增周期中仅损失6%的活性），并且LightCycler®96仪器的光学系统与激发和发射波长相匹配，因此它是测量总DNA时的shou选试剂。

在LightCycler®96系统上实时PCR期间，SYBR Green I检测DNA的基本步骤如下：

在扩增开始时，反应混合物包含变性DNA、引物和染料。未结合的染料分子微弱地发出荧光，产生*小的背景荧光信号，该信号在计算机分析期间被减去。

引物退火后，少数染料分子可以与双链结合。DNA结合导致SYBR Green I分子在激发时发光的显著增加。

在伸长过程中，越来越多的染料分子与新合成的DNA结合。如果连续监测反应，则实时观察荧光的增加。在下一个加热周期DNA变性后，染料分子被释放，荧光信号下降。

在每个PCR周期的延伸步骤结束时进行荧光测量，以监测扩增DNA的增加量。

为了证明只扩增了所需的PCR产物，您可以在PCR后进行熔化曲线分析。在熔化曲线分析中，反应混合物缓慢加热至95°C，这导致双链DNA熔化，SYBR Green I荧光相应降低。仪器持续监测这种荧光降低，并将其显示为熔化峰。每个熔化峰代表特定DNA产物的特征熔化温度（Tm）（其中DNA为50%双链和50%单链）。决定dsDNA Tm的*重要因素是该片段的长度和GC含量。如果PCR仅产生一个扩增子，熔化曲线分析将仅显示一个熔化峰。如果存在引物二聚体或其他非特异性产物，它们将显示为额外的熔化峰。因此，检查PCR产物的Tm可以与在凝胶电泳中通过长度分析PCR产物进行比较。

此产品的工作原理

FastStart Essential DNA Green Master是一种即用即用的反应混合物，专门设计用于在LightCycler®480 Multiwell Plates 96中应用SYBR Green I检测格式，或在LightCycler®96仪器上应用LightCycler®8-管条（白色）。用于执行热启动PCR。热启动PCR已被证明通过*小化反应开始时非特异性扩增产物的形成，显著提*了PCR的特异性和min感性（Chou，Q.等人，1992，Kellogg，D.E.等人，1994，Birch，D.E.，1996）。FastStart Taq DNA聚合酶是一种化学修饰形式的耐热重组Taq DNA多聚酶，在75°C以下无活性。这种酶只有在高温下才有活性，此时引物不再非特异性结合。在循环开始之前，酶在单个预培养步骤（95°C，5至10分钟）中被wan全激活（通过去除阻断基团）。激活不需要其他热启动技术典型的额外处理步骤。

  Roche Fast Start Essential DNA Green Master

产品订购信息：

Roche罗氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster（Roche）  5×100反应(20μl)