液相色谱分析中等度和梯度的区别？
时间：2024-11-05 阅读：187
在液相色谱分析洗脱，分为等度洗脱和梯度洗脱
等度：流动相组成不变通常适用于单一组分或简单组分混合物的分离，如药物主成分含量测定;
梯度：流动相比例随时间变化通常适用于复杂组分混合物的分离，如药物杂质分析。
等度和梯度的优缺点？
等度洗脱：
优点：流速不发生变化，压力稳定，实验结果准确、可靠。
缺点：多组分检测或有杂质干扰情况下分离度可能会差，而且不容易优化，对于某些复杂样品分析时间长，峰形差。
梯度洗脱
优点：
a. 多组分检测或有杂质干扰情况下提高分离能力
b. 缩短某些复杂样品的分析时间
c. 改善峰形，减少拖尾
d. 提高柱效，增加检测灵敏度
缺点：
a. 梯度洗脱方法运行后都需要重新平衡液相色谱柱，耗时较长
b. 由于不同的液相色谱仪存在不同的体积滞后，所以梯度洗脱方法在不同仪器间转移时可能会出现分离结果的差异
c. 流速变化得由程序控制，有时会出错
d. 压力可能会不稳定
e. 混合时可能会产生气泡，影响基线噪声及漂移
f. 高压混合时可能会产生热量
g. 对混合器要求很高，如果混合不好，基线噪声和漂移会很大
h. 由于流动相比例发生变化，基线可能会漂移
i. 实验准确度、稳定性没有等度高
j. 故障率高于等度