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PAGE上层胶染料1000×(0.2 mL)是一种专为聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)设计的高浓缩染料溶液,通常用于标记和可视化上层凝胶(浓缩胶)中的蛋白质样品。该染料帮助研究人员在样品加载和电泳过程中清楚地观察样品位置,确保电泳结果的准确性和可重复性。以下是关于该染料的详细介绍。
PAGE上层胶染料1000×是一种高浓度的染料溶液,通常以0.2 mL的小体积形式提供。该染料在使用时需要根据实验需求稀释至工作浓度(通常为1×)。染料通常为蓝色或绿色,能够与蛋白质样品缓冲液混合,用于在电泳过程中标记样品的迁移位置。这有助于监控电泳过程,确保样品均匀加载并在电泳过程中保持良好的分离效果。
PAGE上层胶染料通常含有一种或多种酸性染料,如溴酚蓝(Bromophenol Blue)或甲基绿(Methyl Green)。这些染料能够与蛋白质样品或样品缓冲液结合,在电泳过程中随着电流迁移,形成易于观察的标记线。
样品加载可视化:染料的主要作用是提供样品加载时的视觉参考,确保每个样品准确加载到凝胶的样品槽中,防止交叉污染或样品丢失。
电泳监控:在电泳过程中,染料线随着电流迁移,使研究人员能够实时监控电泳进展,并根据染料的迁移位置决定电泳结束的时间。
样品迁移检查:染料线的迁移情况有助于确认样品是否按预期迁移,确保电泳的效果和数据的可靠性。
使用PAGE上层胶染料非常简单,通常包括以下步骤:
稀释染料:根据使用说明,将1000×浓缩染料稀释至1×工作浓度。稀释后的染料可以直接与样品缓冲液混合使用。
样品准备:将蛋白质样品与样品缓冲液混合后,再加入适量的1×染料溶液。常规做法是在每个样品中加入1-2 µL的染料溶液。
样品加载:将混合好的样品缓慢加入到已制备好的PAGE凝胶的样品槽中。染料帮助您准确加载样品,并可视化样品槽中的液面。
电泳运行:连接电泳设备,开始电泳。染料线将随着电场迁移,您可以通过观察染料线的位置来判断样品的迁移情况。
电泳结束:通常在染料线接近凝胶的下缘时结束电泳。根据实验需求,您可以稍作调整以获得最佳分离效果。
在蛋白质分析中,PAGE上层胶染料广泛应用于SDS-PAGE和非变性PAGE实验。它帮助研究人员在蛋白质电泳过程中准确加载样品,并实时监控样品迁移情况,确保获得清晰的分离条带。
虽然该染料主要用于蛋白质电泳,但在某些情况下,也可以用于核酸电泳,帮助可视化小片段的DNA或RNA的迁移情况。
对于新手或经验不足的研究人员,PAGE上层胶染料提供了宝贵的视觉反馈,帮助他们优化电泳条件,减少操作错误,提高实验成功率。
高浓缩,低用量:1000×的高浓缩形式意味着每次使用仅需少量即可,大大节省了实验资源。
操作简便:只需简单稀释和混合,即可在样品准备过程中轻松使用。
可靠性高:通过可视化样品的加载和迁移位置,提高了电泳实验的重复性和可靠性。
正确稀释:使用前必须将染料按说明稀释至1×工作浓度,避免因过浓或过稀导致的样品迁移异常或观察困难。
避光保存:染料应避光储存,避免长期暴露在光线下以防止染料降解。
稳定性:染料溶液在使用时应尽量保持新鲜,建议在短时间内用完稀释后的工作液。
PAGE上层胶染料1000×(0.2 mL)是蛋白质电泳分析中的重要工具,通过提供样品加载和电泳过程中可视化标记,提高了实验操作的精确性和结果的可靠性。该染料适用于多种PAGE实验,尤其是在蛋白质和核酸的分离分析中,表现出色。其高浓缩、操作简便和特点,使其成为实验室日常蛋白质研究中的试剂。